斯氏艾美耳球虫内生发育超微结构及杀球灵超微结构效应研究.pdfVIP

维普资讯 7；-77 广 西 农 业 大 学 学 报 1992，11 (4)：73～ 77 Journal of Guangxi Agricultural University 斯 氏艾美耳球虫 内生发育超微结构及 杀球灵超微结构效应研究 周书林 张顺 { 李开平 (牧医系 Sg 砷·f． 摘要 本实验应用电子和光学显微技术，对斯氏艾美耳球虫 (Eimerlastiedae)内生发育阶 段的虫体超微结构进行 了详栅观察。并在此基础上应用苯 乙睛类执球虫药杀球夏 (Diclazurl1． R64433)作用于虫体，对其超微结构的变化进行比较。结果表明：正常发育时，子孢子古有二个折 光体，棒状体的数 目达十多极：第一代裂殖子内具有折光体；第四代B型裂殖子具有一体多棱现 象：小配子体在发育过程中可能分裂成几块 高尔基附体可能参与卵囊壁的形成．杀球夏作用之 后，裂殖子的细胞棱膜模糊 棱质及细胞质 内出现空泡，钱粒体肿张：大配子体的整形成体产生 受到抑射．高尔基体严重增生。 关键词 斯氏 萎兰壁皇 裂殖生殖：配子生殖；蚕超傲结构建 中圈分类号 Q9591153 1 材料和方法 1．1 药物 杀球灵：比利时杨森制药公司 (JanssenPharmeCeutica)出品的含Diclazuril0．5％的预 混剂，使用时配成2ppm的混合饲料。 1，2 虫种 本院兔场病兔肝脏收集的斯氏艾美耳球虫的卵囊，以2．5％重铬酸钾溶液培养 72h (37．c)。孢子化后，接种于 1～3月龄家兔．20d后剖杀，收集球虫卵囊，培养至孢子化，0～ 4．c球箱保存、备用。 1．3 实验动物 文～ 购 自本院兔场的健康兔，1～3月龄，经连续粪便检查 16d，未发现斯氏艾美耳球虫卵 囊。实验期间隔离饲养，喂以消毒的饲料和饮水。 1．4 实验设计 1．4．1 光镜蛆 用实验兔 30只，分成 15组，每组 2只。经胃导管接种饱子化卵囊 5×10’枚，分别于接 种后每 日扑杀 1组，切取肝块 (0．5mnix0．5mm×1．5mM，下同)．按常规方法制石腊切 片，H ·E染色。 幸文 1992—02—28收到． · 现在蜜t省皖南医学院任救． 维普资讯 1．4．2 电镜 组 用实验动物 12只，分成 6组，每组 2只，接种球虫卵囊，第 1，2组剂量为 20×10枚， 第3，4组 10×105枚，第5，6组5×10枚。各组扑杀时间分别为接种后的第 4，6，8，10， 12，14d。切取肝块，以制备 电镜样品和石腊切片。 14．3 药物效应组 用实验兔 l4只，分成 7组，每组 2只。接种 的球虫卵囊剂量第 1～6组同电镜组，第 7 组为5×10’枚。第 1～6组接种时喂以2ppmDiclazuril混合料，第 7组在接种后第 10d开 始投药。第 1～6组扑杀时间分别为第 4，6，8，10，12，15d，第 7组在投药后 10d扑杀，切 取肝块，制电镜样品及石腊切片。 ■‘ 1．5 电镜及光镜样品制作 1．5．1 电镜样品制作 将肝小块迅速置人冷的2．5％戊二醛溶液中 (PH7．4，以0．1M 二 甲砷酸钠缓冲液配 制)，于 0～4．c冰箱 内固定 10h，将样品切成薄片，用缓冲液冲诜 3次，每次 10min。再经系 列丙酮脱水，Epon812树脂浸透、包埋、聚合制成包埋块，修整后切半薄片，亚 甲蓝染色后 在光镜下定位。 以RechertJung超薄 片机切 片，醋酸铀 、柠檬酸铅双重染色 ，于 JEM 一1200EX／S电镜下 80KV观察并记录。 1．5．2 光镜样 品制作 肝小块以福尔马林液固定，以常规方法制片，H ·E染色，光镜下观察并记录。 2 实验结果