睡眠肽DSIP的人工合成及应用初步研究.pdfVIP

目 录 睡眠肽 DSIP 的人工合成及应用初步研究 ………………………………… 1 中文摘要 ………………………………………………………………………1 ABSTRACT…………………………………… ……………………………3 英汉缩略词对照表……………………………………………………………5 前言…………………………………………………………………………7 1 材料…………………………………………………………………………10 1.1 DSIP 的人工合成 ……………………………………………………… 10 1.2 人工合成DSIP 的促眠作用动物实验研究………………………………10 1.3 人工合成DSIP 的毒性实验 …………………………………………11 2 方法 ………………………………………………………………………11 2.1 人工合成睡眠肽 DSIP 的多肽固相化学合成……………………………11 2.2 人工合成 DSIP 促眠作用的动物实验研究……………………………13 2.3 人工合成 DSIP 的毒副作用研究………………………………………16 2.4 实验数据分析与统计学处理……………………………………………16 3 结果 ………………………………………………………………………16 3.1 DSIP的鉴定及纯度分析………………………………………………16 3.2 DSIP 的促眠作用研究………………………………………………… 18 3.3 DSIP的毒性实验…………………………………………………………26 4 讨论 ………………………………………………………………………27 5 结论 ………………………………………………………………………28 参考文献 …………………………………………………………………29 综述…………………………………………………………………………32 攻读学位期间发表的学术论文目录…………………………………………51 致谢……………………………………………………………………………52 2 睡眠肽DSIP 的人工合成及应用初步研究 中 文 摘 要 目的：人工合成目的肽 DSIP 并分析纯化，研究其促眠活性，并进一步研究 经鼻腔给药的促眠作用，同时探索毒副作用，从而为治疗失眠症提供一种 人工合成因而不受来源限制、质量易于控制，在失眠症的治疗中取得较好 效果、给药方便并免除不良副作用，可迅速推广应用的高效外源性促眠药 物。方法：利用生物信息学对已知结构的天然存在睡眠肽进行分析，选择 其α同分异构体并采用全化学合成的固相多肽合成法合成 DSIP，通过高效 液相色谱和质谱法进行纯化分析及鉴定，确定合成的多肽即为设计需要的 目的肽并分析其纯度。进行分组动物实验研究目的肽的促眠效果：用大鼠 初步判定此人工合成的目的肽 DSIP 是否具有促眠作用；确认其效用后第一 步用新西兰大耳白兔判定目的肽经静脉给药是否如文献报道的有诱导新西 兰大耳白兔睡眠的作用；第二步研究鼻腔给药并比较不同剂量 DSIP 的促眠 效果，初步探索出目的肽鼻腔给药的适宜剂量。最后通过病理学实验检测 人工合成的睡眠肽 DSIP 在大中剂量中长期给药后对脑组织是否有毒性。结 果：1.成功合成具有生物活性的睡眠肽 DSIP，经高效液相法纯化后达到所 需要的 95%以上纯度，质谱法与HPLC 法确认合成的是目的肽;2.安装新西兰 大耳白兔脑电极后兔子仍然存活状况良好，给药前后均成功引导出新西兰 大耳白兔的脑电图，记录数据得到有效分析；3.分析脑电图并进行统计学 检验后，鼻腔给药组、静脉给药组新西兰大耳白兔均与生理盐水组新西兰 大耳白兔总睡眠时间、慢波睡眠时间统计学有显著性差异，且给药组慢波 睡眠时间长、总睡眠时间长；4. 分析脑电图并进行统计学检验后，鼻腔给 药 15 nmol/kg 组与 30 nmol/kg 组及 45 nmol/kg 组新西兰大耳白兔总睡眠 时间、慢波睡眠时间统计学有显著性差异，鼻腔给药 30 nmol/kg 组、及45 1 nmol/kg 组新西兰大耳白兔与静注剂量 30 nmol/kg 组新西兰大耳白兔总睡 眠时