儿茶素及其氧化产物与茶多糖清除氧自由基的研究.pdfVIP

试验研究 ‘)『乙茶素及其氧化产物与茶多糖 清除氧自由基的研究 罗学平 (四川省边销茶质量检验中心 四川 名山 625100) 摘 要：茶鲜叶经蒸汽杀青、烘干并粉碎后，分别制备得到儿茶素 (TC)及其氧化产物 (OPI和OPII)与茶多糖 (TPs)。采用邻二氮菲一Fe“氧化法与NBT光还原法，研究了儿茶素及其氧化产物与茶多糖对两种氧自由基的清除能力，结 果表明：TC及其氧化产物与TPs对氧自由基的清除能力均强于Vc，其中TC及其氧化产物对氧自由基的清除能力又明显强于 TPs。在本实验条件下，TC及其氧化产物OPI、0PII、TPs与Vc对·OH的最大清除率分别为93．87％、63．99％、78，86％、 33．59％和33．56％；对·02一的最大清除率分别为83．40％、73．34％、100％、49．74％和29，99％。通过对IC50的计算，确定了几种 试剂对氧自由基的清除能力大小，即清除·0广0PIITCOPITPsVc，清除·0H TCOPIIOPITPsVc。 关键词：儿茶素；茶多糖；氧自由基；·OH；·02- 自由基是带不成对电子的分子、原子或离子，很容易失 处理茶样l5og，得到滤液约4500ml，50℃减压回收乙醇，加 去或得到电子，化学性质十分活泼。生物体内存在的活性氧 人适量体积的去离子水后，抽滤除去水不溶性杂质，得到浓 自由基主要有超氧阴离子自由基 [·02一]和羟基自由基 缩液约400ml。于浓缩液中加人等体积氯仿萃取6次，以除去 [·OH]，在正常情况下，这些自由基不断地产生和被清除， 咖啡碱、色素、树脂等杂质，直至氯仿无色为止。水层按l：l 因而不表现为机体的损伤。但在病理情况下，自由基的产生 的比例加人乙酸乙酯，连续萃取6次，并将乙酸乙酯层用等体 和清除失去平衡，导致细胞结构受到破坏，造成机体损伤， 积水洗涤两次。将得到的乙酸乙酯层用旋转蒸发器于40+5oC 进一步影响机体的正常代谢 [1]。近年来，研究发现自由基能 减压浓缩至150ml，加人无水硫酸钠10g后，过滤，滤液继续 引起脂质过氧化作用，导致组织损伤、细胞功能衰退或丧失 减压浓缩至干，得到淡黄色粉末l1．50g，得率为7．67％，儿茶 [1 ， 因此，寻找外源性的自由基清除剂和抗氧化剂已越来越 素的纯度为79．83％。 引起人们的重视。 1．3．2儿茶素氧化产物的制备 大量研究表明，茶叶中的多酚类化合物具有较强的清除 1．3．2．1化学氧化产物 (OPI)的制备 体内自由基及抗氧化作用 [3．4_。另据研究发现，半发酵茶的抗 称取5g上述制备的儿茶素，加人于500mlpH8．8的NaHCO3 氧化活性大于不发酵茶和发酵茶 ]，表明儿茶素的氧化产物 溶液中，磁式空气泵鼓气反应5h。反应结束后，用HCl中和， 可能比儿茶素具有更优异的生物活性。此外，多糖类对自由 然后用等体积乙酸乙酯萃取6次，萃取液用等体积水洗涤4次， 基也有较强的清除作用 。6 ，可见合理的利用茶叶及其有效成 乙酸乙酯层加人l0g无水硫酸钠除去水分后过滤，滤液回收乙 分具有重要意义。因此，笔者对儿茶素类及其氧化物和茶多 酸乙酯后，得到干燥的固体0．90g，为氧化产物I(0PI)，得率 糖清除·02-和·OH的能力作初步探讨，以期为茶叶的综合利用 为l8．0％。OPI经乙酸乙酯溶解，并用pH8．0的PBS(磷酸盐缓 及高效安全的天然抗氧化剂的筛选提供一定的理论依据。 冲液)缓冲溶液洗涤，经光谱扫描分析后初步认为其中含有 1 材料与方法 茶黄素 (图1)。l8 1．1 实验材料