重组戊型肝炎疫苗菌种库的建立及其稳定性_曹玉锋.pdfVIP

DOI ：10.13200/j.cjb.2012.11.28.caoyf.017 中国生物制品学杂志2012 年11 月第25 卷第11 期 Chin J Biologicals November 2012 ，Vol. 25 No. 11 · · 1427 · · 疫苗研究 重组戊型肝炎疫苗菌种库的建立及其稳定性 曹玉锋，徐军，时成波，孟多佳，迟春萍，王玉梅，贾媛，张剑锋，常东英，王伟善 【摘要 】 目的 建立重组戊型肝炎疫苗工程菌三级种子库，并分析其稳定性。方法 将工程菌株HEV179 ／ BL21 （DE3）复 苏活化，经全面检测合格后冻干保存即为原始种子库；原始种子库传代扩增，经全面检定合格后，冻干保存即为主种子库；主种 子库经传代扩增和全面检定合格后，甘油冻存即为工作种子库。对三级种子库进行全面检定，并对工程菌进行冻干及甘油冻存 稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性检测。结果 建立的三级种子库经全面检定合格；菌种冻干稳定性、甘油冻存稳定 性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性指标均合格，菌种生长特性、遗传和表达稳定性均未发生变化。结论 成功建立了 HEV179 ／ BL21 （DE3）工程菌三级种子库，菌种稳定性良好，适用于重组戊型肝炎疫苗的工业化生产。 【关键词】 疫苗；肝炎病毒，戊型；种子库；稳定性 【中图分类号】R373. 2 + 1 R392-33 ［文献标识码】A ［文章编号】 1004-5503 （2012）11-1427-04 Establishment and stability of seed bank of recombinant hepatitis E vaccine CAO Yu-feng ，XU Jun ，SHI Cheng-bo ，MENG Duo-jia ，CHI Chun-ping, WANG Yu-mei, JIA Yuan，ZHANG Jian- feng ，CHANG Dong-ying ，WANG Wei-shan （Changchun Institute of Biological Products Co. ，Ltd ，Changchun 130062，China） 【Abstract 】 Objective To establish three-tier seed bank of recombinant hepatitis E vaccine and study its stability. Methods Recombinant E. coli HEV179 ／ BL21 （DE3）was resuscitated ，activated and subjected to overall control tests ，and the qualified ones were lyophilized as primary seed bank. The seeds from primary seed bank were subcultured ，propagated and subjected to overall control tests ，while the qualified ones were l