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大叶桃花心木幼苗营养贮藏蛋白质的研究
NRA持续下降;切除种子后,幼苗叶片NRA升高,种子切除越早,对叶片NRA
的影响就越大。
与大树的营养贮藏蛋白质相同,大叶桃花心木幼苗的营养贮藏蛋白质的主要
成分也是18k.Da和21kDa两种蛋白质。在汞一溴酚蓝染色的石蜡切片中,营养
贮藏蛋白质呈颗粒状,存在于普通薄壁细胞的液泡中。
幼苗很早就开始积累营养贮藏蛋白质。在叶片成熟后一周,就可用
白质,在叶片成熟后两周,这两种蛋白质的含量明显增加,同时,在光学显微镜
下,可看到次生韧皮部和次生木质部及部分皮层(内层)和髓及射线细胞中都有
被染成鲜兰色的贮藏蛋白质颗粒,但形成层细胞中没有看到有营养贮藏蛋白质。
营养贮藏蛋白质在植株中的分布存在明显差异,在茎的各个部位中,自上而下逐
渐减少,在根中没有观察到贮藏蛋白质颗粒。施肥条件下,茎也是在叶片成熟后
一周才开始积累营养贮藏蛋白质,但是,其含量明显高于不施肥的植株,表明施
肥促进营养贮藏蛋白质的合成和积累,但不影响营养贮藏蛋白质开始积累的时
期。
在叶片成熟后不久。幼苗开始抽新梢。无论施肥与否,茎中积累的营养贮藏
蛋白质都会随着新梢的生长发育而被动用。当新稍叶片旺盛抽出时,新稍下的一
段茎中营养贮藏蛋白质很快消失。但是,在施肥条件下新梢的生长量显著大于非
施肥条件下形成的新梢。例如,非施肥条件下新梢只抽生1-2片叶,而在施肥条
件下则可抽生出3-4片叶。这种差异很可能与茎中积累的营养贮藏蛋白质的量的
不同有关。新梢叶片成熟后2周,在新梢和新梢下的茎中又积累了大量的营养贮
藏蛋白质。 ’
2年生幼苗的茎中积累了丰富的营养贮藏蛋白质,主要分布在次生韧皮部的
韧皮薄壁细胞和射线薄壁细胞中。抽新梢后,当新梢叶片成熟时,茎中积累的营
养贮藏蛋白质已完全消失。在新梢叶片成熟后一周,新梢及其下面的茎中又积累
2
了大量的营养贮藏蛋白质。
总之,我们的研究结果表明,大叶桃花心木幼苗具有丰富的营养贮藏蛋白质,
其积累和动用模式与成年植株枝条中的营养贮藏蛋白质的非常相似,加之幼苗的
体积小,生长周期短,可作为研究树木营养贮藏蛋白质积累和动用调控机制的优
良模型。
关键词:大叶桃花心木幼苗营养贮藏蛋白质硝酸还原酶活性
种子贮藏蛋白质解剖学特征生长发育
缩略词表
VSPs 营养贮藏蛋白质
NR 硝酸还原酶
NiR 亚硝酸还原酶
SDS.PAGE SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳
CBBR250 考马斯亮蓝R.250
免疫印迹
Western-blotting
Acr 丙烯酰胺
Bis 甲叉双丙烯酰胺
SDS 十二烷基黄酸钠
Aps 过硫酸铵
TE]陋ED 四甲基乙二胺
NC膜 硝酸纤维素膜
Veronalacetate 醋酸钠.巴比妥钠缓冲液
PBS 磷酸盐一氯化钠缓冲液
NRA 硝酸还原酶活性
Tris 三羟甲基氨基甲烷
Gly 甘氨酸
NBT,BC口 硝基氮蓝四唑,5。溴4氯.3一Ⅱ引哚磷酸盐
f.wt 鲜重
引 言
氮是植物生长发育不可缺少的一种大量矿质元素。近年来,关于氮素吸收、
同化、运输和种子氮贮藏的研究已取得了较大的进展,但是营养器官中的氮贮藏
研究仍然是植物氮代谢研究的薄弱环节。营养器官中的季节性氮贮藏上树木氮素
代谢的显著特征,在树木的生长发育以及树木对逆境反应方面起着重要作用。
二十世纪八十年代后期,在树木的营养器官中
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