应用同种异体脱细胞尿道基质修复尿道缺损的实验研究.pdfVIP

硕士论文：应用同种异体脱细胞尿道基质修复尿道缺损的实验研究 功能的人工支架，因而许多学者将研究方向转移到生物体本身组织器官的细胞骨 架一即脱细胞基质支架上来，很多学者已在此方面取得显著成果。脱细胞小肠粘 膜基质，脱细胞膀胱粘膜，脱细胞血管基质等被用于尿道重建研究，并取得一定 效果，说明利用脱细胞组织基质再造尿道有其可行性。 因此，我们在前人组织工程化尿道已有研究的基础上提出以脱细胞尿道为基 质再造修复尿道，观察其能否恢复尿道的功能，并观察其组织再生及尿瘘狭窄等 并发症的发生情况，从而为尿道再造修复提供一种新的材料。 材料与方法 1．实验动物与分组：12只成龄新西兰雄性大白兔，体重2．5-3．5Kg．根据 术后观察时段的不同分为6组，分别是术后2、3、4周，2、3、6月6个时段， 每组2只兔。 输液器等。 显微镜及显微外科器械，6-0／4．0可吸收羊肠线，8F导尿管， 3．脱细胞兔尿道基质的制备：取健康成年兔完整尿道组织，以 观察分析脱细胞效果。 4．手术方法：采用水合氯醛腹腔注射麻醉(100～150mg／kg)，必要时耳 缘静脉追加剂量。自耳缘静脉缓慢持续滴入5％GS(30ml／h)，至手术结束。各 皮后，以安尔碘消毒铺无菌巾。插入8F导尿管，于阴茎腹侧正中偏外作纵行切 口，切开皮肤、浅筋膜及Buck’fl,筋膜，暴露出部分前尿道及海绵体。将该段尿 道小心从阴茎海绵体上游离，长度约3em。切除游离的尿道1．5cm，将备好的并 已经新洁尔灭浸泡30分钟的脱细胞基质，移植修复缺失尿道。借助显微镜，两 端吻合口以6-0可吸收羊肠线行8针间断端端吻合。于吻合口9点、3点处留置 2-0兰色涤纶线两根作为基质边界标志。6-0可吸收线缝合Buck’s筋膜及浅筋 膜，4-0可吸收线缝合皮肤，术毕。将尿管固定于兔尾上。术后以庆大霉素4万 单位肌注qd，5—7天，尿管留置7天后拔除。术后所有动物分开饲养。 5．观察指标：进行脱细胞基质制备过程观察，通过H—E染色观察分析脱 2 硕士论文：应用同种异体脱细胞尿道基质修复尿道缺损的实验研究 细胞的过程及效果；移植术后2、3、4周，2、3、6月活体观察排尿情况：有无 尿瘘、尿道狭窄，观察伤口有无肿胀、炎症、排异反应。尿道逆行造影来观察尿 道是否通畅，有无狭窄及尿瘘。组织学H-E染色观察分析尿道光滑程度，粘膜 化情况，基质血管及平滑肌细胞再生情况，血管长入脱细胞基质的评估，可以通 察辅助分析平滑肌细胞再生情况。 6．统计方法：全部计量资料以“均数±标准差(贾±sD)”表示。两组之 间均数的比较采用两配对样本的t检验，p0．05有统计学意义，全部统计分析 均在SPSSl0．0软件包上进行。 结果 1．用除垢剂+氨水联合提取法对兔的完整尿道进行脱细胞处理11天，获得 了理想的无细胞尿道基质 2．经过本实验研究表明，脱细胞尿道基质替代尿道在3周～6个月内可发生 完整的内腔上皮化、迅速的血管形成及平滑肌束的再生，且没有排斥反应。术后 3周，尿道管腔已完全上皮化。随时间的改变，基质的结构不断改善并接近于正 常。 3．通过基质中血管数量及直径的观测，我们发现，基质中新生血管的数目 开始时随时间的推移而增多，且是一些细小的血管，随后血管数量逐渐下降，但 血管直径却不断加大。至6个月时，基质中血管数量及直径逐渐接近正常尿道。 4．平滑肌细胞的再生在3～6个月时改善明显。3个月时，平滑肌细胞由两端 吻合口侵入基质中，至6个月时平滑肌细胞束己长入基质的l，3，但定向欠佳， 且细胞分化不良。 5．通过逆行尿道造影，12只动物中，8只动物未发现尿瘘及明显尿道狭窄， 宿主与移植物间基本无法辨认。 硕士论文：应用同种异体脱细胞尿道基质修复尿道缺损的实验研究 结论 脱细胞尿道基质术后能获得良好的粘膜覆盖，再造尿道时仅有两个吻合口， 如用于尿道下裂一期修复则只有一个吻合口，理论上尿瘘发生的机率降低，而且 实验发现尿道狭窄的机率亦不高。另外异体脱细胞尿道基质替代尿道缺损，材料 来源相对充足，手术简单、创伤小，是一个良好的、值得迸一步研究的可用于尿 道再造的替代材料。 关键词： 脱细胞尿道基质尿道再造