蔬菜的种子生产.ppt

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马铃屠脱毒技术 就是利用茎尖部分没有病毒的特性、通过连续切茎尖,在无菌环境条件下,利用人工配置的培养基,培育出无毒试管苗,然后利用试管苗在防虫温室或网室内繁殖微型薯原原种。在人工或天然隔离条件下,利用原原种繁殖一级原种和二级原种。二级原种在天然隔离条件(高纬度或高海拔冷凉地区、风速大的海岛等地)繁殖一级良种供生产中使用。 脱毒种薯存在使用寿命年限。在北方地区,一般为四至五年。而在南方地区寿命仅为二至三年。 (一)脱毒苗的生产 (二)微型脱毒种薯原原种(微型薯)的生产 (三)常规脱毒原原种生产技术 (四)马铃薯生产用种薯的生产 二、马铃薯脱毒种薯生产环节及技术 1、茎尖脱毒材料的选择; 2、高温处理钝化病毒及催芽; 3、培养基的制备; 4、茎尖组织剥离和接种; 5、组织培养; 6、病毒检测; 7、脱毒苗快繁 (一)脱毒苗的生产 1、茎尖脱毒材料的选择 要在推广优良品种中选择健壮并具有本品种典型性状的单株,作为茎尖脱毒的材料。 2、高温处理钝化病毒及催芽 将渡过休眠后的入选种薯材料,放在30℃ ~40 ℃的条件下,经30天左右,一方面可有效降低花叶病毒的浓度,提高脱毒成功率;另一方面,也同时进行了室内催芽。 3、培养基的制备 茎尖组织需在培养基上进行培养,由培养基提供生长所需营养。常用的培养基是MS培养基。含有大量元素N、P、K,中量元素Ca、Mg、S,微量元素Zn、Mn、B、Cu,还有维生素、腺嘌呤、蔗糖、琼脂等,pH5.7 ~ 5.8。根据需要,做成固体培养基或液体培养基(不加琼脂),装在试管或三角瓶中,高压灭菌后放在无菌室备用。 4、茎尖组织剥离和接种 选芽长至3~4厘米,还未充分展叶时,将芽剪下。先将外面几层叶片剥除,然后将其放入烧杯,用纱布封口,在自来水下冲洗半个小时,取出放到无菌室进行消毒。一般先在95%酒精中迅速沾一下,然后在5%漂白粉液中浸泡5~10分钟,再用无菌水冲洗4~5次。将消过毒的芽放在40倍解剖镜下,用消过毒的刀剥取带有1~2个叶原基的茎尖,长度约0.2毫米,接种到有培养基的试管中,每个试管一个茎尖。 还有一种方法是,把经过消毒的薯芽,直接插入培养基中,生根长成苗后,再做剥离,成活率高,效果好。 5、组织培养 将已接好的茎尖,放在培养室中培养试管苗。培养室的温度要保持在20~25℃,光照为2000~3000勒克斯,每天16小时以上光照。约经30~40天,茎尖可明显伸长,4个月左右发育成有根系和3~4片叶的小苗——茎尖苗。此时可将其在无菌条件下进行单节切段,并种于带有培养基的三角瓶中,继续培养,进行扩繁。25~30天再次长成“茎尖苗”,又可进行单节切段扩繁。 6、病毒检测 成苗后,每个芽的后代,取两瓶苗进行病毒检测。检测病毒的种类,一般是5~8种: PVX、 PVY、 PVA、 PLRV(卷叶病毒)、PVM、PVS、PSTVD(纺锤块状类病毒)、PMTV等。常用方法是:采用双抗体酶联免疫吸附法(DAS-ELISA),要找有资质的专业检测单位检测,价格较便宜的单位是:江苏省 江阴沃土农业生物科技开发有限公司,行内较认可。 检测无病毒的,脱毒成功,相应芽的后代加速扩繁;检测有病毒的,相应的材料全部淘汰。 7、脱毒苗快繁 当确认脱毒成功、无病毒后,还需鉴定其是否具有该品种的典型性状,以防止在剥离茎尖培养过程中发生无性变异。当确认试管苗符合品种特性并不带病毒后,即可继续扩繁试管苗——基础苗。将产生的基础苗分成两部分:其一,连续扩繁,以满足生产原原种和微型种薯需要;其二,低温保存,为下年生产扩繁施用。 基础苗使用两年左右应重新进行剥离,进行更新,以保持质量。 试管苗的扩繁需在无菌条件下,进行单节切段,平放在有培养基的三角瓶中,置于培养室内,保持23~25℃,约20~25天即可长成7~8片叶的小苗。单节切段每株苗可切7~8段,以此速度,一株试管苗从茎尖培养开始,一年可繁百万株试管苗。 (二)微型脱毒种薯原原种(微型薯)的生产 微型薯的生产:在温室或防虫网棚中进行。 当基础苗繁殖到一定数量时,先打开三角瓶封口,在温(网)室中进行炼苗,使其加粗,然后取出将根部培养基洗净,将从基础苗上剪下的茎段在生根液中浸泡5~10min,移栽到以蛭石或消毒草炭为基质的育苗盘中。苗期和结薯期分别喷洒促进扎根、长苗和结薯的营养液,人工调节控制光、温、水、肥、气等生长条件,扦插密度3×3㎝或4×3㎝,每㎡扦插830-1100株,脱毒苗在基质生长60天左右收获一茬,每㎡可收

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