参考课件：邻二氮菲分光光度法测定试样中微量铁 - 韶关学院.PPT

分析化学实验 教学重点 ：1.掌握722S型分光光度计的使用操作技术。2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理、方法 和标准曲线制作、数据处理分析。 二、试剂及仪器 仪器：分析天平；容量瓶；吸量管； 比色皿；722S可见分光光度计等。 三、实验步骤 三、实验步骤 五、注意事项 六、数据记录及处理 铁含量的测定 总结：你学到了什么？ 化学 韶关学院化学与环境工程学院分析化学教研室 《分析化学实验》 实验十 邻二氮菲分光光度法测定微量铁 教学难点 掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理、方法和标准曲线制作、数据处理分析。 一、实验原理 邻二氮菲和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成 一种稳定的橙红色络合物 ，该配合物的最大吸收 峰在波长508nm处，ε＝1.1×104，lgK稳＝21.3。铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。其吸收曲线如图所示。显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。有关反应如下： 2Fe3+ + 2NH2OH·HC1＝2Fe2+ +N2↑+2H2O+4H++2C1－ 用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。 标准曲线法 T 的取值为 100.0 % ~ 0.0 % A 的取值为 0 ~ ∞ 全部透射 T = 100.0 % A=0 全部吸收 T = 0.0 % A=∞ 吸光度和透光率 朗伯－比尔定律 1706年，朗伯发现，A∝b；1852年，比尔发现，A∝c 朗伯－比尔定律 朗伯－比尔定律的物理意义：当一束平行单色光垂直照射到均匀、非散射的吸光物质的溶液时，溶液的吸光度与吸光物质的浓度及液层厚度成正比，由此，可以用标准曲线法进行定量测定。 注意：吸光度具有加和性 试剂： (1) 0.100 mg·mL-1铁(55.85)标准储备液 准确称取0.2159 g NH4Fe(SO4)2·12H2O (M=482.22)置于烧杯中，加少量水溶解，加5 mL 1:1HCl溶液，定量转移到250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 (2) 1%盐酸羟胺水溶液： 用时现配。 (3) 0.1%邻二氮菲水溶液： 用时现配，避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。 (4) HAc~NaAc 缓冲溶液：称取136g优级纯醋酸钠，加120mL冰醋酸，加水溶解后稀释至500mL。 二、试剂及仪器 四、实验步骤及操作要点 称样溶解 生成沉淀 检验沉淀是否完全 陈化 折叠定量滤纸使之形成水柱 过滤 洗涤(沉淀杯的洗涤和漏斗的洗涤) 检验沉淀是否洗涤干净 包裹沉淀 碳化 灰化 灼烧 称量 计算 三、实验步骤 1．显色标准溶液的配制 在序号为1～6的6只250 mL容量瓶中，用吸量管分别加入0，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL铁标准溶液(含铁 0. 10 mg·mL-1)，分别加入5 mL 1%盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入10 mL HAc~NaAc 缓冲溶液、20 mL 0.1%邻二氮菲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。 2．吸收曲线的绘制 在分光光度计上，用1cm吸收池，以试剂空白溶液(1号)为参比，在440～560 nm之间，每隔10 nm测定一次待测溶液(5号)的吸光度A，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。 3．标准曲线的测绘 以步骤1中试剂空白溶液(1号)为参比，用1cm吸收池，在选定波长下测定2～6号各显色标准溶液的吸光度。在EXCEL中，以铁的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 注意：每改变一次试液浓度，比色皿都要洗干净并用蒸馏水荡洗。 4．铁含量的测定 取试样溶液2.00mL，按步骤1显色后，在相同条件下测量吸光度，由标准曲线计算试样中微量铁的质量浓度。 铁含量的测定 标准曲线的绘制： 0.10mg/mL铁标准溶液 参比 1 ml 2ml 3 ml 4 ml 5 ml 以不加铁标准溶液的试液为参比液，上一步骤所选择的最大吸收波长为测定波长，依次测定标准系列中各溶液的吸光度A值。 以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。 分光光度计要预热30min，稳定后才能进行测量。