蛋白质化学6-理化性质与分离分析.pdf

蛋白质的理化性质、 测定及分离纯化 蛋白质的理化性质 蛋白质的理化性质及应用 • 蛋白质分子量大，是一种胶体溶液； • 具有特定的空间构象，分子量一定分 子筛层析； • 在大部分pH条件下，蛋白质分子同时存 在两种电荷等电点沉淀，盐溶，盐析， 电泳，离子交换层析等； • 一般而言，蛋白质分子上同时存在疏水 和亲水区域有机溶剂沉淀，疏水层析 (反相层析)。 蛋白质的胶体性质 • 蛋白质分子量大，介于一万到百万之间，故其分子 的大小已达到胶粒1-100 nm范围之内。球状蛋白质的 表面多亲水基团，具有强烈吸引水分子的作用，使蛋 白质分子表面常为多层水分子所包围--水化膜，从而阻 止蛋白质颗粒的相互聚集。 • 与低分子物质相比，蛋白质分子扩散速度慢，不易 透过半透膜，粘度大，在分离提纯蛋白质过程中，可 以利用蛋白质的这一性质，将混有小分子杂质的蛋白 质溶液置于半透膜制成的透析袋或管内，浮于流动动 水或适宜的缓冲液中，小分子杂质皆易从袋中透出， 保留了比较纯的蛋白质--透析(dialysis)。 •颗粒大小：在1-100 蛋白质溶液是一种分散 系统，蛋白质分子颗粒 nm之间，属胶体，因 是分散相，水是分散介 此溶于水，成为亲水 质。分散相质点小于1 胶体。 nm为真溶液，大于100 nm为悬浊液，介于1- •稳定亲水胶体的因素：100 nm为胶体溶液。 水化膜 - - - 表面电荷相同 + + + - - - - - + •不通透性：半透膜 + - - - + - (semipermeable - + -- - + + - - - - membrane) - + + + - -