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家蚕蚕蛹过敏原几丁质酶基因的克隆和原核表达载体的构建
· · Journal of Tropical Medicine Vol．10 No．5 May 2010
520
文章编号 （ ）
[ ] 1672-3619 2010 05-0520-04 硕博专栏论著
· ·
家蚕蚕蛹过敏原几丁质酶基因的克隆和原核表达载体的构建
1 2 * 2 * 2 2
刘硕 黄钟 罗新萍 刘志刚 陈思
， ， ， ，
南昌大学医学院 南昌 深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所 深圳
（1． ， 330006 ； 2． ， 518060 ）
摘要 目的 克隆 表达家蚕蚕蛹过敏原几丁质酶基因 并构建其原核表达载体 方法 提取家蚕的总
【 】 、 ， 。
克隆家蚕过敏原几丁质酶的全长基因 设计简并引物 扩增家蚕几丁质酶基因的完整开放阅读
， ， ，
RNA RT-PCR
框 与 载体连接 构建原核表达载体 结果 成功克隆家蚕主要变应原几丁质酶基因并构建其原核表达
， pET-28a ， 。
载体 该基因含有长度为 的开放阅读框 编码 个氨基酸 该蛋白质的相对分子质量为 电点
。 1 668 bp ， 555 。 61 500 ，
为 5．78 ，编码序列与数据库中已知的家蚕几丁质酶基因的同源性为 99％ 。 结论 成功克隆家蚕蚕蛹主要过敏原
几丁质酶基因并构建了原核表达载体 为家蚕蚕蛹过敏原几丁质酶的重组表达和免疫活性鉴定等奠定了基础
， 。
关键词 家蚕 过敏原 几丁质酶 基因克隆 原核表达载体
【 】 ； ； ； ；
中图分类号： 文献标识码：
R384．9 A
Cloning and Prokaryotic Expression of Chitinase Gene
from Bombyx mori Linaeus
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