人端粒酶逆转录酶启动子驱动重组腺病毒治疗人前列腺癌的动物实验研究.pdfVIP

中文摘要中父捅要 对裸鼠移植性前列腺癌进行治疗，从而将HSV．tk基因选择 性地导入前列腺癌细胞，并能把GCV转化为毒性代谢物一 一三磷酸丙氧鸟苷，其作为链韵终止剂，干扰细胞分裂时 DNA的合成，最终导致前列腺癌细胞阻抑或死亡而对正常细 胞没有影响。从而体现该治疗系统的安全性、有效性以及靶 向性。 O 方法：于裸鼠右前背部皮下接种5×17个／m1LNCaP细 胞悬液O．1m1，建立人前列腺癌裸鼠移植瘤模型。待成瘤约 50mm3后，将荷瘤裸鼠随机分为4组，每组1O只。分组以 及给药方式如下：A组，空白对照，不给药；B组， 09Pfu／ml重 Ad-hTERT-HSV-tk对照组，经尾静脉注射5．O×1 0．1 组腺病毒Ad-hTERT-HSV_tkml，第1，5，lO天各1次，第2～ l O．1m 5天腹腔注射PBS1；C组，GCV对照组，经尾静脉注 O．1 射PBSm1，第l，5，lO天各1次，第2～15天腹腔注射GCV B组，腹腔注射GCV同C组。观察肿瘤体积、重量、抑制 率、体积一时间曲线以及裸鼠生存期。实验结束后，取前列腺 肿瘤组织制备石蜡切片进行船染色，应用流式细胞学法、 TLn怩L法及透射电镜检查检测肿瘤细胞凋亡，免疫组化染 色检测增殖细胞核抗原，测定增殖指数。 对裸鼠移植瘤具有明显抑制作用，在整个观察期内， 组(尸O．05)，对照组各组之间相比无显著性差异；比较切除 13 移植痛重量明显轻于对照组(尸=O．OoO7)，也明显轻于 中文摘要 33 8和 O．OOO 肿瘤细胞稀疏分散排列，肿瘤血管明显减少，组织结构紊乱， 多为纤维组织所代替，呈退化表现。治疗结束后，取心、肺、 肝组织进行形态学观察，与正常对照的心、肺、肝组织相比 得的细胞周期中Gl／S期细胞数平均占84％，明显高于时照 组，而G2／M期细胞却明显低于对照组，流式细胞技术及 TUNEL法测定治疗组的凋亡率明显高于对照组(尸O．05)， 透射电镜可检测到肿瘤细胞凋亡，另外免疫组化法测定的增 殖指数，治疗组明显低于对照组(尸O．05)。 前列腺癌移植瘤的生长，治疗组裸鼠的肿瘤生长速率明显慢 于对照组，具有明显的量一效曲线，而且裸鼠的生存期显著延 制肿瘤细胞的增殖和促进肿瘤细胞的凋亡而达到治疗效果 的，并且该系统不损害正常组织，具有很好的安全性和靶向 有效且靶向性高的基因疗法，为前列腺癌等实体瘤的生物治 疗提供了一条新的途径。 jl}’ 关键词：前列腺癌；基因疗法；自杀基因；人端粒酶逆 转录酶；启动子 英文摘要 of adenoVirus The recombinant therapeuticemcacy hTERT in controIled animalmodelof by promoter human c