伊布利特对兔左室中层细胞快钠电流活性的影响.pdfVIP

中文摘要 抗室性心律失常的部分离子通道机制。 材料与方法： 1实验动物：新西兰纯种大耳白兔60只，由河北医 科大学实验动物中心提供，雌雄不拘，体重1．5-～2．0kg。 随机抽取10只兔作为正常对照组(Con)，25只兔作为伊 布利特低浓度组(10一mol／L)，25只兔作为伊布利特高 浓度组(10～mol／L)。 2细胞分离：利用酶解(胶原酶I，Sigma公司)的方 法分离心室肌细胞，三组细胞均来源于左心室前壁中层， 即M细胞。定位方法：用眼科剪剪去心外层1～1．5mm及 心内层1～1．5mm心肌组织，留取中层2～3mm的心肌组 织及为中层细胞。 ．3给药方法：分别把伊布利特纯品(由北京红惠生物 制药股份有限公司提供)溶解于INa细胞外液中使伊布利特 终浓度达到10～mol／L、10一mol／L，分别用含有不同浓度 伊布利特的细胞外液灌流细胞，流速2ml／min，大约3～5 分钟。 4电流记录：应用膜片钳全细胞记录方法，记录伊布 I．V曲线、 预下左室中层M细胞lNa活性的变化，包括INa 稳态失活曲线及失活后再恢复曲线。并与正常对照组进行 比较分析。电流记录的刺激程序由pulse+pulsefit软件控 制，通道信号经EPC一9膜片钳放大器放大，通过Ag—AgCI 电极丝和填充电极内液的微电极导入细胞，产生的电流信 号经EPC．9转换，为pulse+pulsefit软件采集、分析。 5统计学分析：应用SPSS10．0软件包进行统计学分 中文摘要 析。计量资料以均数±标准差(i±s)表示，首先进行组 间均衡性检验，两组计量资料采用t检验，成组资料问比 较采用方差分析，率(％)的比较用x2检验，以PO．05 为有显著性差异的标准。 结果： 1； I_V曲线的影响 1伊布利特对兔左室中层细胞INa 观察正常对照组、伊布利特高浓度组(1075mol／L)及 伊布利特低浓度组(10-6mol／L)左室中层细胞所记录的原 始INa电流形态曲线。三组细胞INa的I—V曲线，均在一70mV 激活，一20mV达峰值，+50mV时反转。应用伊布利特干 预组与对照组相比，I—V曲线上移，以伊布利特高浓度组 活电位、峰值电位、反转电位及I．V曲线的形态轨迹均无 影响。 ±4．33pA／pF(n=12 为--25．48±3．43 cells)，峰值电流密度较对 pA／pF(n=14 cells)， 该组INa峰值电流密度的下降更明显，较对照组下降了 显著性，P0．05。 2伊布利特对兔左室中层细胞INa稳态失活曲线的影 响 中．文摘要 INa电压依赖性稳态失活曲线，伊布利特高浓度组(10 组相比，失活曲线明显左移(即向超极化方向移动)，以 伊布利特高浓度组(10≮mol／L)左移更加明显。V0．5对照 组为一76．2±4．3mV(n=lOcells)，伊布利特高浓度组(10 。mol／L)为一100．0±4．6mV(n=8cells)，与对照组比较 有非常显著的差异，PO．01；伊布利特低浓度组．(10．6 mol／L)Vo．5为．89．1±4．6mV(n=lOcells)，与对照组和伊 布利特高浓度组(10_5moi／L)比较均相差有显著性， PO．5。 3伊布利特对兔左室中层细胞INa失活后再恢复曲线 的影响 三组细胞INa失活后再恢复过程，当两个脉冲间隔时间 为15ms时，对照组INa恢复61％，伊布利特高浓度组’(10 —5mol／L)仅恢复11％，而伊布利特低浓度组(10_6mol／L) 恢复42％，而当两个脉冲间隔时间为75ms时，对照组恢 复100％，而伊布利特高浓度组(10_5mol／L)仅恢复61％， 伊布利特低浓度组(10．6mol／L)恢复86％。说明伊布利 恢复明显减慢，再恢复时程延长，和对照组比较差异有显 著性，分别为PO．01和PO．05；伊布利特高浓度组(10— 5mol／L)I