免疫耐受叙利亚仓鼠人胃癌异种移植模型传代研究.pdfVIP

中文摘要 保持正常免疫应答能力并能稳定传代的免疫耐受动物人肿 瘤异种移植模型。该模型无论是对肿瘤的基础研究还是临床 应用研究都将具有重要意义。 方法：用10吮l微量注射器给新生24h之内的叙利亚仓 细胞悬液，每只试验鼠接种0．1m1，建立初代模型。取一只 濒死荷瘤仓鼠或3周龄荷瘤仓鼠(因3周时若仍荷瘤即可视 为终身荷瘤)，无菌条件下开腹取移植瘤，用机械和酶消化 法制细胞悬液，用HaIll【’s液洗3遍，最终制成细胞悬液浓度 为2×1010 cell·L-1。同前法接种给新生24h之内的叙利亚仓鼠， 连续传至15代。观察比较各代试验鼠终身荷瘤率及存活时 间、移植瘤的组织结构及核型分析。 结果： 1 传代情况 给新生24小时之内的叙利亚仓鼠经皮下进腹腔接种人 大小的实体瘤，2周龄时100％荷瘤，之后约有2／3试验鼠移 植瘤呈持续生长，直至死亡，表现为终身荷瘤。另1／3试验 鼠移植瘤逐渐消退，直至3周龄时完全消失，因此若3周龄 时仍然荷瘤，即可视为终身荷瘤。15代鼠终身荷瘤率在 显著差异(PO．05，见tab．1)。 2移植瘤的肉眼观察 各代终身荷瘤鼠死亡后解剖发现，皮下和腹腔均有多个 肿瘤(见F嘻1～4)，肿瘤表面无被膜包围，与邻近组织紧密 2 中文摘要 连接，质地较硬呈乳白色。形态不规则，大小不等，长宽径 多少不一，一般为3～11个，各代未发现明显差异。 3光镜观察 各代移植瘤细胞均呈圆形或椭圆形，核大胞浆少，核分 裂相多见，细胞呈条索排列，偶有腺腔形成或有腺腔形成倾 向(见Fig．5～12)。这与原胃癌手术标本基本相似。移植瘤 组织内均未见有宿主淋巴细胞浸润。 4透射电镜观察 分别取第1、5、7、10、15代终身荷瘤仓鼠移植瘤瘤块， 做透射电镜检查，瘤细胞多为近圆形或椭圆形，排列致密成 片，有少数细胞排列呈腺腔状，细胞表面有较密集的微绒毛， 长短不一，排列紊乱。细胞核质比例偏大，核膜曲折凹陷， 核仁明显增大，多为1～3个。细胞质内含有丰富的多聚核 糖体及中等量的内质网和线粒体。细胞联结装置极少，发育 细胞和BGC．823裸鼠移植瘤细胞的超微结构基本一致。各代 均未见明显差异。 5移植瘤的染色体分析 从第1、5、7、10、15各代随机选择一个濒死荷瘤鼠或 三周龄荷瘤仓鼠的移植瘤进行染色体分析，每例观察100个 中期分裂移植瘤细胞的染色体，染色体数目多少不等，分布 在46～98之间，染色体高峰集中在56～65之间，占75％以 上，属亚三倍体。可见双着丝点、缺失、易位等畸变染色体。 3 中文摘要 带显示：符合人类细胞遗传学命名的国际体制，属于人类细 胞核型，各代均未见有宿主染色体渗入。 结论： 1 免疫耐受叙利亚仓鼠人胃癌异种移植模型各代无显著差 异，为可传代模型。其移植瘤与常规人胃癌异种移植模型一 样保持了原肿瘤的组织结构、病理形态和生物学特性。 2宿主仅是对移植瘤的特异性免疫耐受，对其他抗原刺激 仍然存在着正常免疫应答能力，所以不易被微生物感染，普 通饲养即可，价格便宜，易于推广。 3此外，叙利亚仓鼠孕期较短，配种时间明确，能准确推 算预产期，新生仔鼠的鼠体较大，对实验接种计划及操作极 为有利。并且其颊囊亦可做免疫隔离器官的人瘤移植，这样 同时建立同种动物不同机理的人瘤异种移植模型，对肿瘤的 比较研究具有重要意义。 因此，该模型可望成为人类肿瘤研究领域中一种较为理 想的模型。 关键词：免疫耐受；叙利亚仓鼠；异种移植；人胃癌； 动物模型 4 茎查塑墨 The on the of study passage tumorofhuman stomachinimmune tolerance