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锥栗SRAP反应体系的建立与优化创新
第 32 卷 第 3 期 经 济 林 研 究 Vol. 32 No.3
2014 年 9 月 Nonwood Forest Research Sep. 2014
锥栗SRAP反应体系的建立与优化
a a，b a
向 晖 ，袁德义 ，贾宝光
（中南林业科技大学a. 经济林育种与栽培国家林业局重点实验室；
b. 经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室，湖南 长沙 4 10004 ）
摘 要：为了建立锥栗 SRAP-PCR 反应体系，从而为今后的锥栗分子生物学研究提供理论参考，以锥栗叶片基
因组DNA 为材料，采用单因素试验和正交试验相结合的研究方法，对影响锥栗 SRAP-PCR 反应体系的模板用量、
2 ＋
Mg 浓度、dNTP 浓度、引物浓度和 Taq DNA 聚合酶浓度这 5 个主要因素进行了优化试验。试验确立的适合锥
2 ＋
栗的 SRAP-PCR 反应体系为：20 μL 体系中，模板 DNA 用量为 40 ng，Mg 浓度为 1.8 mmol/L ，dNTP 浓度为
280 μmol/L ，Taq DNA 聚合酶浓度为 2.0 U ，引物浓度为 0.6 μmol/L 。
关键词：锥栗；SRAP ；单因素试验；正交试验设计
中图分类号：S603.2 ；S664.2 文献标志码：A 文章编号：1003—8981(2014)03—0008—08
Establishment and optimization of SRAP reaction system in Castanea henryi
a a,b a
XIANG Hui , YUAN De-yi , JIA Bao-guang
(a. The Key Lab of Non-Wood Forest Product of State Forestry Administration; b. The Key Lab of Cultivation and Protection for Non-
wood Forest Trees of Education Ministry, Central South University of Forestry Technology, Changsha 410004, Hunan, China)
Abstract: In order to establish a SRAP-PCR reaction system, and provide theoretical references for the molecular biology
research on Castanea henryi in future, taking the genomic DNA of C. henryi leaves as material, the five main factors of
concentrations of template DNA, Mg2+, dNTP, primer and Taq DNA polymerase in SRAP-PCR amplification system were
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