试验植物细胞中的后含物.pptVIP

实验三 植物细胞中的后含物 实验目的 了解植物细胞中的代谢产物。 练习植物组织徒手切片技术。 练习几种简单的组织化学染色方法。 主要仪器、试剂及材料 光学显微镜、载玻片、盖玻片、双面刀片、镊子、手术刀、手术剪、毛笔、酒精灯、蒸馏水、吸水纸、 碘－碘化钾溶液（1％，0.2％）、酒精（96％）、苏丹Ⅲ染液、 马铃薯块茎、洋葱鳞茎、鸭跖草叶、花生、小麦子粒纵切永久制片、无花果叶横切永久制片 实验步骤 1.植物细胞中淀粉粒、糊粉粒和油滴的检测 （1）淀粉粒：将马铃薯块茎切成长3－5cm、截面约5mm*5mm的小条，作徒手切片，可看到切面中的细胞为多角形或大致呈圆形，细胞内有许多大小不等、呈卵形的颗粒－淀粉粒。调节聚光器光圈使光线明暗适当，并轻调细调焦螺旋，可观察到淀粉粒上的围绕着脐点形成的偏心圆状明暗相间的轮纹。从盖玻片的一侧加一滴0.2%的碘-碘化钾溶液，这些颗粒立即变为蓝色，表明这些颗粒确系淀粉粒。 实验报告 1、绘图： 马铃薯块茎细胞 （示淀粉粒）。 蓖麻或花生胚乳细胞（示糊粉粒）。 蓖麻或花生胚乳细胞（示油滴）。 2、填图：见图板1（图18－2，18－3）。 讨论 分析植物细胞中后含物的类型及其对植物生长发育的意义。 探讨花青素与植物器官颜色变化的关系。 * * 实验目的 仪器材料 实验步骤 实验报告 讨论 徒手切片 概念：徒手切片法是持刀片，将新鲜材料或经固定的材料切成薄片，而后装片，用于显微观察的方法。 一般材料的徒手切片 准备：取一培养皿，盛以清水适量，准备好刀片、滴管、毛笔等工具。 取材和整形：取待切片材料，用刀片整理为合适手持的形状。 切片：以左手的三个手指握持材料，材料的上缘应保持略高于食指而拇指略低于食指，中指顶住材料下端而在切片时配合拇指和食指向上推送材料。右手持刀片，将刀片平放在左手的食指上，刀口向内并与材料断面平行，右手手臂向后拉动，使刀片沿着食指侧沿自左前方向右后方滑行，将材料一次切下。 装片与染色：可以有三种方式。 叶片或叶状体的徒手切片 对叶片和叶状体做徒手切片，材料特别不易握持，采用一些支持物夹住材料后再进行切片，能得到比较薄的切片。 将支持物切成长约2cm、横截面约5mm*5mm的条形，在其一侧切出深约3mm的纵长切口。从叶状体材料上剪下一长约2cm、宽约4mm的长条，夹入支持物的切口中。然后，将支持物连同材料一起做徒手切片。 （2）油滴： 取蓖麻或花生子叶作徒手切片法切成薄片，放到培养皿中以清水浸泡约10min后，用毛笔选一薄片于载玻片上，加上一滴0.5%的苏丹Ⅲ染液，染色10min，并用酒精灯微微加热，盖上盖玻片。在显微镜下观察细胞中有被染成橘红色的大小不等的圆球形油滴。细胞被切开后部分油滴从细胞中溢出并汇集成橘黄色的块状。 （3）糊粉粒： 用上述方法对蓖麻胚乳或花生子叶作徒手切片，但要注意，切片不要见水而立即投入盛有95%酒精的培养皿中，浸泡处理10min。用毛笔选一薄片于载玻片上，加上1滴1%碘-碘化钾溶液染色，加盖玻片封片。在显微镜下观察，细胞中大小均匀的黄色的圆形或椭圆形颗粒为糊粉粒。注意观察糊粉粒中的蛋白质结晶体。 2、植物细胞中花青素和无机盐结晶体的观察 （1）花青素： 取洋葱鳞片叶，在其外表面紫色较深处用刀刻划出一5mm*5mm的小方格，制成临时装片观察。可见洋葱细胞花青素呈淡紫色，均匀地溶解在细胞中。 （2）结晶体： 撕取鸭趾草一小块叶表皮一小块，制成装片在显微镜下观察，可找到草酸钙结晶体。 另取榕属植物叶作徒手切片，其中部分细胞膨大，细胞内悬挂着一个呈瘤状或桑葚状的钟乳体，为碳酸钙结晶体。 *