端粒酶作为肿瘤标志物的研究进展论文.docVIP

　　端粒酶作为肿瘤标志物的研究进展论文 长期以来，普遍认为癌症是由破坏细胞正常生长调节的多种基因突变引起。尽管不同的癌症可能涉及到一个特定的基因突变，个体的癌症往往表现为以多基因突变为特征。除了这种特殊的病因学外，最近的研究支持一种新的模式，即端粒酶的激活可能是许多恶性肿瘤发生的先决条件1。 1 端粒、端粒酶与细胞永生 端粒是真核细胞染色体末端的特殊DNA-蛋白质结构，其DNA的特殊是含有大量的（TTAGGG）n串联重复并富含G的重复序列，这些序列在进化中高度保守。端粒结构功能主要有2个：一是可保护染色体基因组免受被降解或有害重组，其二是端粒重复可为染色体末端提供一种可消耗的非编码序列以暂时缓冲或取消末端复制问题所带来的染色体DNA进行性缩短。大多数普通体细胞的端粒会随周期性复制而逐渐缩短.freela等5发现正常的肠道粘膜有端粒酶活性，他认为这种酶表达起源于肠道基底干细胞，但其水平比癌性粘膜低10倍～100倍。尽管造血祖细胞和激活的淋巴细胞表达很强的端粒酶活性，但端粒仍然逐渐缩短，提示在这些细胞是以一种与端粒长度无关的方式上调酶活性6。 由于组织样品通常是不同类型细胞的混合物，其中可能含有表达端粒酶的正常细胞，如果不了解由正常细胞产生的背景表达水平，就有可能将正常细胞的表达误判为肿瘤细胞的表达。 3 端粒酶作为肿瘤标志物早期诊断肿瘤 研究表明，大多数肿瘤组织细胞均有较高水平的端粒酶表达。而且在一些前侵袭性病变（如发育异常、原位癌）端粒酶表达的频率很高2，3，表明端粒酶激活是癌症多步骤形成过程中的早期事件。常见恶性肿瘤端粒酶表达情形见附表。癌组织端粒酶表达有以下特点。 3.1 癌组织表达阳性率很高，除少数肿瘤外，阳性率均在80%以上。而癌旁组织和正常相应组织阳性率低于10%，为低水平表达。总体上，端粒酶表达与临床特征无明显关系，但与临床病理学特征有一定联系。一些研究表明端粒酶活性反映了细胞的恶变程度。例如SCLC的恶性程度高于NSCLC，故端粒酶的检出率和活性均高于NSCLC7。胃癌中端粒酶阳性肿瘤恶性程度较高8。前列腺癌组织中端粒酶活性相对水平与病理分化有关，高水平端粒酶活性在分化差的前列腺癌中更常见9。 3.3 在一些前侵袭性病变中端粒酶表达水平增加，如结肠肿瘤10、口腔原位癌和发育异常病灶1约半数表现端粒酶活性，尽管前侵袭病变并非都进展为癌，但其中端粒酶表达阳性者似乎可列为密切监控的对象。 3.4 迄今为止的资料提示端粒酶可预测脑膜 瘤、急性髓性白血病和胃肠道癌症的预后。Langford等12报道在端粒酶阳性的普通脑膜瘤患者中端粒酶活性与预后显著相关，这些形态学上良性的普通脑膜瘤中端粒酶的出现提示其中含有一群无限增殖细胞。在急性髓性白血病，端粒酶活性水平与特定的预后差的细胞遗传学特征（11q异常、染色体5和7缺失）相关13。 由于端粒酶在大部分恶性肿瘤检出率很高，有可能用作癌症筛查的标志物。但是以侵入性方法获取肿瘤组织样品十分困难，非创伤性或微创伤性获取样品确定其端粒酶表达已受到积极关注。 kinoshita等14比较了一组膀胱癌肿瘤样品与随意尿、膀胱冲洗脱落细胞的端粒酶表达。肿瘤组织样品、膀胱冲洗液、随意尿中端粒酶检出率分别为98%（41/42）、84%（36/43）、55%（23/42）。而45例膀胱癌尿脱落细胞学仅42%检出癌细胞。无癌者的膀胱冲洗液未检出端粒酶。尿液和冲洗液脱落细胞端粒酶在I级癌检出率为75%（9/12），II级为96%（27/28），而细胞学检出癌细胞率I级为8%（1/12），II级为46%（13/28）。表明端粒酶检测癌症的敏感性显著高于细胞学检查，对膀胱癌的早期诊断和随访十分有用。 yoshita等5对有或无结肠癌的住院患者的结肠冲洗物检测端粒酶，其敏感性为60%（9/15），特异性为100%。在头颈部癌患者的口腔冲洗物中，端粒酶阳性率达32%（14/42），未发现口腔冲洗物阳性而癌组织是阴性的现象11。 作为微创伤性方法的细针穿刺在肿瘤的诊断取样中被常规采用。Hiyama等16在15例后来经术后标本组织病理学确诊的乳腺癌的针吸标本中全部检出端粒酶表达。在有或无乳腺癌的患者中，细针抽吸样品端粒酶检测的诊断敏感性为67%，特异性90%17。Nouso等18用21G针活检取肝癌患者肝组织，端粒酶阳性率80%（8/10），与手术标本的端粒酶阳性率87%（20/23）无明显差异。说明细针活组织取样检测端粒酶可作为癌症早期检出的有力手段。 4 端粒酶测定方法 端粒酶由RNA和酶蛋白组成，其活性依赖于其RNA成分，用RNA酶处理后活性大部分丧失1。目前检测端粒酶表达有二种方法：一是以测其DNA聚合酶活性的端粒重复扩增法（TRAP）；二是用RT-P