系统指纹定量法鉴别龙胆泻肝丸质量论文.docVIP

　　系统指纹定量法鉴别龙胆泻肝丸质量论文 【摘要】 建立龙胆泻肝丸(Longdanxiegan pill，LDXGP)的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱，以系统指纹定量法评价其质量。采用RPHPLC法，以宏定性相似度为参量对12批LDXGP进行聚类分析，确定用其中10批生成对照指纹图谱(RFP)，以此RFP为标准用系统指纹定量法评价12批LDXGP质量。以龙胆苦苷为参照物峰，确定60个共有指纹峰，建立了LDXGP的HPLC指纹图谱。用系统指纹定量法鉴别出8批质量合格.freel，宏定量相似度Pm和均化系数相对偏差α来控制中药质量，克服了上述缺点。实验建立了12个厂家的LDXGPHPLC指纹图谱，并采用本方法测定其化学成分数量、分布比例和化学成分整体含量差异，为LDXGP质量控制提供新参考。 2 系统指纹定量法原理7 从系统观和整体论角度出发，中药质量控制应采取整体定性分析与整体定量分析相结合的方法。指纹图谱是从n维向量空间进行表征和描述的模型方法，系统指纹定量法是在对中药系统指纹整体定性分析基础上，直接对中药系统指纹进行整体定量分析，是对中药系统的整体量化评价，具有真实性和可靠性。中药指纹图谱评价实质是针对样品指纹向量X=(x1,x2,…,xn)和标准指纹图谱的对照指纹向量Y=(y1,y2,…,yn两个系统的定性定量差异比较，xi与yi为各指纹峰面积。双定性相似度(定性相似度SF与比率定性相似度S′F)7均值Sm称为宏定性相似度，见式(1)，能够整体监测中药化学指纹数量和分布比例。当Sm满足表1值时，认为中药化学成分数量、分布比例满足相应级要求。根据指纹系统模糊性降低情况，可决定是否进行整体定量鉴别评价。双定量相似度(投影含量相似度C与定量相似度P)7均值Pm称为宏定量相似度，见式(2)，能够准确监测中药化学指纹整体含量情况。样品向量X和对照指纹向量Y与a=(1,1,…，1)的夹角余弦分别为γX和γY8，分别代表样品和对照指纹图谱的指纹峰信号均化程度。样品均化系数相对偏差α定义见式(3)，用于限定中药化学指纹比例变异范围。将Sm、Pm及α结合评价中药质量的方法称为系统指纹定量法，据此将中药质量可划分为8级，见表1。Sm=12(SF+S′F)=12∑ni=1xiyi∑ni=1x2i∑ni=1y2i+∑ni=1xiyin∑ni=1xiyi2(1) Pm=12(C+P)=12∑ni=1xiyi∑ni=1y2i+∑ni=1xi∑ni=1yiSF×100%(2) α=1-γxγy=1-PC(3)表1 系统指纹定量法划分中药质量级 Table 1 Traditional Chinese Medicine (TCM) quality grades divided by systematic quantified fingerprint method Para.ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧSm≥0.950.90～0.950.85～0.900.80～0.850.70～0.800.60～0.700.50～0.60 0.5Pm (%)95～10590～11080～12075～12570～13060～14050～1500～∞ α≤0.050.05～0.100.10～0.150.15～0.200.20～0.300.30～0.400.40～0.50 0.50质量 Quality极好 Best很好 Better好 Good良好 Fine中 Moderate一般 mon次 Defective劣 InferiorSm：宏定性相似度(macro qualitative similarity); Pm：宏定量相似度(macro quantitative similarity);α：均化系统相对偏差(relative deviation of leveling coefficient)。 3 实验部分 3.1 仪器与试剂 1100型液相色谱仪(配有DAD检测器、四元低压梯度泵、在线脱气装置、自动进样器)和ChemStation工作站(美国Agilent公司);RE52旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);Sarturius2BS110S分析天平(北京赛多利斯天平有限公司);KQ50B 型超声波清洗器(昆山市超声仪器公司);KDM 型控温电热套(山东鄄城华鲁仪器公司)。 甲醇与乙腈(色谱纯, 山东禹王实业有限公司禹城化工厂)，冰醋酸(色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心)，95%(V/V)乙醇(分析纯,康科德科技有限公司)。龙胆苦苷、黄芩苷、甘草酸单铵和绿原酸对照品 (中国药品生物制品检定所)。12批LDXGP生产厂家(批号)：S1北京同仁堂制药有限公司(8083023)、S2赤峰天奇制药有限公司、S3河北药都药