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　　组织芯片技术在医学研究中的应用进展论文 【关键词】 组织芯片；医学研究；应用 1 组织芯片的概念 组织芯片（tissue chip)又称组织微阵列（tissue microarray),是将数一、数百、甚至上千个小组织按预先设计的顺序整齐地排放在一张玻片上制成的组织切片［１］。组织芯片按放置组织的多少分为多组织切片和组织切片和组织微阵列；按组织来源的不同分为人类组织芯片、动物组织芯片；人类组织芯片又可分为人类疾病组织芯片、正常组织芯片和胚胎组织芯片；人类疾病组织芯片又可分为恶性肿瘤组织芯片、良性肿瘤组织芯片、其他疾病组织芯片；根据研究目的不同，恶性肿瘤组织芯片又可分为单一肿瘤、多种肿瘤、进展期肿瘤、特定病理类型肿瘤等数十种不同的组织芯片。 2 组织芯片的发展史 1986年，Battifora［２］将脱蜡脱水的组织标本手动包裹成香肠形，随机组合，石蜡重新包埋，常规切片，后用免疫组化方法检测同一玻片上多个组织，这是较早的组织芯片雏形。次年.freelm。行常规组织处理，石蜡包埋，制成目标蜡块，做5 μm组织切片，并进行常规HE染色，用于组织定位。 32 组织芯片制作的主要步骤［７］ 采用手工制作组织芯片，主要流程是：①形态学观察，核对组织或有关疾病的诊断。②选择目标组织并分别在组织切片和相应石蜡组织块上标记，即组织定位。③制做阵列蜡块。先做空白石蜡块，并根据样本的数量及所要求的组织片的大小在空白石蜡块上钻孔，组织片的直径与孔径一致，从众多的供体组织蜡块中采集到数十至数千的圆柱形小组织。一般用06 mm直径针进行取材，将其放在直径08 mm的微阵列蜡块上，每个微阵列蜡块可包括400~800 个标本，增大取材的直径并不能更好的代表组织全貌，但在同一蜡块上进行多达20点取材则会更好的代表组织特性，而且不会损坏标本。将采集到的组织整齐地排列到受体蜡块中制成微阵列蜡块。④切片。组织片的厚度一般为5 μm，与常规组织切片基本相似，特别应注意裱片的温度，以40℃为宜。温度过高组织片易离散，过低则难以保证组织片的展开。将切好的组织片通过辅助系统转移并固定到胶化和硅化玻片上即成为可自动化分析的组织切片［6］。 4 组织芯片的主要作用 41 就方法学而言，周小鸽等［８］认为，将HE染色、组织化学、免疫组织化学、原位杂交、荧光原位杂交等技术用于组织芯片上都是可行、有效的。通过这些方法可以了解组织形态组化特性蛋白和核酸在组织细胞中的定位和分布。 42 从组织病理学角度来看，组织芯片可用于细胞表型分析和基因表达分析。 421 细胞表型分析：运用组织芯片对细胞进行高通量表型分析，可以寻找筛选与疾病发生发展及预后相关的生物分子标记。Kononen等［6］用标准的免疫组化法对组织芯片上的645例各种乳腺癌组织标本进行p53、erbB2和ER基因检测，不但发现这些标本与乳腺癌预后密切相关，而且与大组织片检测结果完全一致。Hoos等［９］用组织芯片技术对59例纤维母细胞瘤进行免疫表型分析，结果组织芯片上Ki67、p53和成视网膜细胞瘤蛋白（pRB)的表达与全部切片之间的染色一致性分别为96%、98%、91%，与完整切片相比，3个06 mm活检标本的组织芯片提供了一个可靠的高通量免疫组化表达系统。张红英等［10］应用组织芯片技术研究A103和Inhinbia α在肾上腺皮质肿瘤中的诊断价值，证实A103及lnhinbin α的联合应用对于明确肾上腺皮质肿瘤的诊断与鉴别诊断有较高价值。Chen等［１１］等利用组织芯片辨别头颈癌低氧调节蛋白，发现IKK β是一种新型内原性肿瘤低氧性标记物，可能代表一种抗癌治疗的新靶标。Lugli等［１２］利用组织芯片分析HepParl在正常肝脏组织和肿瘤组织中的表达，认为HepParl是分辨原发性和继发性肝癌合适的工具。这些研究均充分显示了组织芯片技术在细胞表型分析中的极大应用潜力［13］。 ４.2.2 基因表达分析 运用组织芯片进行基因表达分析，可以寻找疾病基因。Kononen等［6］用645例乳腺癌组织芯片同时进行p53、雌激素受体（ER）、myc、erbB2、CCDN1、MYBL2等6种基因的检测，发现新鲜和石蜡包埋的组织标本检测结果无差异。为了便于对原发性、复发性、转移性前列腺癌分子变化进行高通量分析，Bubendorf等［１４］用荧光原位杂交（FISH）分析含371例前列腺组织芯片的连续切片并进行5种基因表达分析，在激素耐受性转移瘤中，雄激素受体（AR）基因表达率为22%，myc为11%，CyclinD1为5%。在局部复发性肿瘤标本中，相应的百分比为234%、40%和80%；erbB2和Nmyc在进展期前列腺癌的任何阶段均无表达。Schraml等［１５］报道了17种来源于恶性肿瘤的组