豆制品中乌洛托品（征求意见稿）.docVIP

DBS 江苏省地方标准 DBS 32/ XXXXX—XXXX 食品安全地方标准 豆制品中乌洛托品的测定 液相色谱-质谱/质谱法和激光拉曼光谱法 XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 江苏省卫生厅发布 前言 本标准系首次发布。 食品安全地方标准 豆制品中乌洛托品的测定 液相色谱-质谱/质谱法和激光拉曼光谱法 范围 本标准适用于豆制品中乌洛托品残留量的检测和确证。 本标准第一法为液相色谱-质谱/质谱法仲裁法；第二法为激光拉曼光谱法适用于快速测定。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 第一法 液相色谱-质谱/质谱法 原理 试样经乙腈提取，正己烷去除脂溶性杂质，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 试剂 乙腈：色谱纯。 氨水（25%）。 甲酸铵。 无水硫酸钠：650℃灼烧4h,冷却后储于干燥器中备。 试剂配制 流动相A（10mmol/L0.63g甲酸铵溶于1L水中，用氨水调节pH值至7.6。 乙腈饱和的正己烷：20mL乙腈中加入100mL正己烷，充分震荡后，静置分层，取上层正己烷备用。 标准品 乌洛托品（分子式：C6H12N4）标准物质：纯度大于99%。 标准溶液配制 标准储备液：准确称取乌洛托品标准品（3.4），用乙腈配制成浓度为100 μg/mL的标准储备液。储备液在0 ℃～4 ℃冰标准中间使用液：准确量取标准储备液（3.5.1）1.0mL，用乙腈稀释并定容至100mL，浓度相当于1.0μg/mL，使用前配制。 0.22μm，有机相。 仪器和设备 液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。 分析天平：感量为1mg。 pH计：测量精度±0.024000r/min）。 涡旋混匀器。 均质器。 电动振荡器：振荡频率300次/分。 氮吹仪。 分析步骤 试样制备 腐竹、豆粉等水分少的豆制品:称取粉碎、过20目筛的试样2g（精确至0.001g），于50mL具塞离心管中，加入10mL乙腈，涡旋混匀，于震荡器（震荡频率300次/分）上震荡提取20min，以3500r/min离心5min，吸取上清液2mL于10mL离心管中，加入2mL乙腈饱和的正己烷溶液（3.3.2），涡旋混匀1min ，在3500r/min下离心2min，弃去上层正己烷，重复用乙腈饱和的正己烷溶液萃取一次，下层液过0.22μm滤膜(3.6.1)，待测。 豆腐等含水较多的豆制品：准确称取2g（精确0.001g）于50mL具塞离心管中，加入5mL乙腈，均质20s,用约5mL乙腈清洗均质刀头，合并洗液于离心管中，摇匀，加入适量无水硫酸钠3.2.5)，使其过量至固体颗粒物不结块,震荡提取20min（震荡频率300次/分），3500r/min离心5min，上清液转移至25mL容量瓶中，再分别用5mL乙腈洗剂样品两次，离心，上清液合并至容量瓶中，乙腈定容至刻度。吸取其中3mL提取液于10mL离心管中，加入3mL乙腈饱和的正己烷，涡旋1min?，在3500r/min下离心2min，弃去上层正己烷，重复用正己烷一次。准确移取2.5mL下层乙腈溶液于10mL玻璃管中，40摄氏度下氮气吹干，用乙腈定容至1mL，过0.22μm滤膜，待测。InnovationTM Kinetex HILIC 100A Column，50mm×2.1mm，2.6μm或相当者； 流速：0.2mL/min； 柱温：25℃； 进样量：5μL； 流动相及梯度洗脱条件见表1。 流动相及梯度洗脱条件 时间min 流动相A（3.3.1）%B（乙腈）% 0 90 10 0.4 90 10 0.5 10 90 2.5 10 90 3.0 90 10 6.0 90 10 质谱条件 离子源：电喷雾离子源； 扫描方式：正离子； 监测方式：多反应检测（MRM）＞50 ＞20～50 ＞10～20 ≤10 ±20 ±25 ±30 ±50 定量测定 根据样液中乌洛托品残留量浓度的大小，选择峰高相近的标准工作溶液， 对样品和标准工作使用溶液进样，以峰面积为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，标准工作溶液和样液中乌洛托品的响应值均应在仪器的检测线性范围内。 平行试验 按照以上步骤对同一样品进行两次平行测定。 空白试验 除不称取试样外，均按照以上步骤进行。 分析结果的表述 试样中乌洛托品的含量按式(1)计算：