反相高效液相色谱法分析甲苯、萘和联苯.PDF

反相高效液相色谱法分析甲苯、 萘和联苯 主讲教师：石金辉 一、目的要求 理解反相高效液相色谱法的基本原理及影响 组分保留值的因素。 学习用反相高效液相色谱法分析混合芳烃。 掌握HPLC分析的定性、定量方法。 理解流动相组成对样品组分保留时间的影响。 2 二、方法原理 用非极性的十八烷基键合固定相，多以甲醇 水或乙睛 - - 水作为流动相（极性流动相），用以分离非极性或极 性小的化合物，该方法是目前最常用的反相液相色谱 法。 对非离子型化合物，分子极性愈大，保留值愈小；在 同系物中链越长、苯环越多，保留值越大。 流动相也影响被测组分的保留值，流动相的极性越 小，保留值越小。在常用的溶剂中，以水的极性最 大，因此流动相中水的含量减小，流动相的极性减 小，组分的保留值减小。 3 实验任务 分离甲苯、萘、联苯 种芳烃的混合物， 3 由于苯环个数或分子的表面积有显著差 别，因此在反相高效液相色谱中得到很 好的分离。用保留时间定性，根据峰面 积标准工作曲线定量。 4 三、仪器与试剂 仪器：Shimadzu LC-10ATVP高效液相 色谱仪，检测器为SPD-M10Avp二极管 阵列检测器。 5 液相色谱流程图 进样器 流动相 输液泵 柱温箱 检测器 数据处理 6 Shimadzu LC-10ATVP高效液相色谱仪 7 三、仪器与试剂 色谱条件： 色谱柱： （ × ） 分析柱 Shimadzu VO-ODS 4.6 150mm C18 流动相：A液：水；B液：甲醇。用前用超声波脱气。 UV-检测器，检测波长254nm。 进样体积：20uL;流动相流速：1.0mL/min。 样品：甲苯、萘、联苯的混合甲醇溶液。 8 四、仪器操作步骤 开启色谱仪，先开启泵、在线脱气机、柱温箱、检 测器，再开启系统控制器，最后开启电脑。