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十二味舒筋丸中士宁含量测定【摘要】目的:建立十二味舒筋丸中士的宁含量测定的高效液相色谱法。方法采用HPLC法对十二味舒筋丸中士的宁的含量进行测定。色谱条件为: C18柱(5μm， 4.6mm×250mm)，柱温室温，流动相为乙腈－0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10％磷酸调节pH值为2.8）（21：79）；流速1.0mLmin-1 ；检测波长254nm。结果士的宁色谱分离良好， 浓度与峰面积呈良好线性关系， 线性范围为30.0～180.0μgmL-1，标准曲线方程为Y=5×10-5x+0.0075，r=0.9991(n=6)。平均加样回收率为96.6% (n=9，RSD=1.7% )。结论本方法测定了10批十二味舒筋丸中士的宁的含量，该方法分离度好、快速、简便、重现性好 【关键词】高效液相色谱法;十二味舒筋丸;士的宁 【中国分类号】R284【文献标识码】A【文章编号】1044-5511（2011）10-0065-01 十二味舒筋丸是医院的自制制剂，由当归、马钱子粉、乳香、防风等十二味药材组成，用于治疗风湿。组方中的马钱子粉，苦，寒，有毒，归肝、脾二经。有通络止痛的功效，但其性大毒，使用不当容易引起中毒。马钱子粉主要成分为生物碱．其中主要是番木鳖碱（ 即士的宁）、伪番木鳖碱、马钱子碱、伪马钱子碱、番木鳖次碱、奴伐新碱（马钱子新碱）、α-可鲁勃林、β-可鲁勃林、土屈新碱等，还含有番木鳖苷, 绿原酸等。其中番木鳖碱（士的宁）为主要活性成分。本文采用高效液相色谱法测定十二味舒筋丸中士的宁的含量，为十二味舒筋丸的质量标准的制定和用药安全提供一个参考 1 实验部分 1.1 仪器、试药与样品 Agilent1100高效液相色谱仪； Agilent1100色谱工作站；紫外检测器；超声波发生器；电子天平；酸度计 甲醇、乙腈为色谱纯，其他均为分析纯，水为纯化水。士的宁对照品（中国药品生物制品检定所） 1.2 色谱条件 迪马 C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈－0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10％磷酸调节pH值为2.8）（21：79）；流速1.0mLmin-1 ；检测波长254nm；柱温：室温 1.3 溶液制备 1.3.1对照品储备溶液：取士的宁对照品15mg，精密称定，置25mL量瓶中，加三氯甲烷使溶解至刻度，摇匀 1.3.2 供试品溶液取10丸，剪碎，混匀，称取约1.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液5mL，超声混匀，搅拌使溶解，放置1小时，加甲醇50mL，置水浴上加热回流1小时，放冷，通过铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液转移至100mL量瓶中，用甲醇洗涤药渣和滤器，洗液并入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取25mL，蒸干，?渣加甲醇适量使溶解，并转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得 1.3.3 阴性对照液：取缺马钱子粉的样品，同法制备空白对照液 1.4 线性关系考察 精密吸取士的宁对照品储备液，用甲醇配制成30.0、60.0、90.0、120.0、150.0、180.0μgmL-1的对照品溶液，进样10μL，测定峰面积。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线并进行回归分析。标准曲线方程为Y=5×10-5x+0.0075，r=0.9991(n=6) 1.5 精密度试验 取同一份对照品溶液，连续进样6次，以峰面积积分值计算RSD， RSD为0.6% 1.6 回收率试验 精密称取样品6份,分别精密加入对照品溶液，配制成高、中、低三个不同浓度的样品各3份,按照供试品溶液方法操作,进样10μL，测定峰面积，计算含量。结果平均加样回收率为96.6% (n=9，RSD=1.7% ) 1.7 重现性试验 精密称取样品6份，按照供试品溶液方法操作,进样10μL，测定峰面积，计算含量，RSD为1.0% 1.8 稳定性试验 取同一份供试品溶液，分别于0、1、2、4、6、9小时进样，测定峰面积，计算RSD，为1.8% 1.9 样品测定 精密称取样品，按照供试品溶液配制方法操作，用外标一点法计算含量,用60.0μgmL-1的对照溶液作为对照品溶液。测定10批样品,平均含量为1.03mg/丸。结果见表1 表1 样品含量(mg/丸) 2 讨论 2.1 马钱子粉的活性成分为士的宁,因此选择测定士的宁来为十二味舒筋丸的质量控制提供参考 2.2本文选用了高效液相色谱法测定士的宁的含量,在色谱条件的选择上,参考了中国药典2010年版一部中马钱子粉和舒筋丸的含量测定方法 2