茶树细胞与基因工程研究进展.pdfVIP

综 述 茶树细胞与基因工程研究进展 孟令峰 齐桂年 (四川农业大学茶学系 雅安 625014) 摘 要：综述了近年来茶树细胞与基因工程的研究进展，包括组织培养、次生 物质的生产、原生质体培养、分子标记及基因的克隆与转移等方面，并分析了在这 方面今后的研究方向。 关键词：茶树；组织培养；分子标记；基因克隆；遗传转化 茶树细胞和基因工程属于茶树生物技术的范畴，近年来 将叶片培养在MS+10mg·L～2，4一D+I．0mg·L-’KT+6％ (体积分数) 在茶树细胞工程和基因工程的研究主要包括以下几个方面： 蔗糖培养基上培养，产生黄绿色、松软易碎的愈伤组织以及类 茶树细胞与组织培养、茶叶次生物质的生产、原生质体培养 胚状体；继代培养于MS+2．0mg·L～2，4一D+10．0mg·L BAP培养 及其细胞融合、分子标记以及基因的克隆与转移。本文就以 基上的愈伤组织，可诱导生根。刘德华 研究：添加1m 上几点进行了综述： kgNAA，5mg，kgAde，3mg／kgGA3的1／2MS是促进叶胚状体形 1 茶树细胞工程的研究进展 成较好的预培养基；添~I4mg／kgBA，2mg／kglBA，5mg／kgAde， 1。1 茶树组织培养技术 lmg／kgGA 的MS培养基能促进胚性愈伤组织的形成。添加 1．1．1 生殖器官的培养 4mg／kgBA，2mg／kglBA，1mg，kgGA3的MS培养基，能诱导不定 吴振铎 …首次以茶树子叶为外植体成功获得再生植株。 芽和胚状体的形成和生长；试管苗不完全叶形成愈伤组织比 刘德华 [“ 对薮北种自然杂交种子的子叶柄进行培养，用带 完全叶要快；添加1mg／kgNAA，5mg／kgAde的1／2MS培养基、 有少量子叶的子叶柄，不经愈伤组织直接形成植株。1988至 112ER培养基能促进根的形成。Kato 以幼叶为外植体，将 1989年又以茶籽下胚轴为外植体，不同处理诱导分化芽，并 其置于不同2，4一D浓度的培养基中培养，在叶的基部能直接 且获得了植株。认为子叶柄在微繁殖中是保持种性的较好材 或通过胚性愈伤组织诱导出体细胞胚状体 [21]0暨淑仪等对叶 料，下胚轴分化芽的能力比较强，容易形成 “丛生芽”，且易 片诱导的愈伤组织的形成作了细胞组织学观察，结果表明： 继代培养，繁殖系数大。肖海军对茶树子叶的分化进行了研 愈伤组织形成于叶外植体叶肉中的小叶脉周围以及主脉中的 究，认为芽对不定胚的发生具有抑制作用，畸形胚分化率从 薄壁细胞。 子叶柄到子叶片依次增高；畸形胚增殖能力强，能分化成正 1。2 茶树次生物质的生产 常胚并且分化成植株。胜尾清 ]、土井芳意 、9]最早对花 茶树次生物质生产的研究是茶树生物工程的重要方面。 药进行培养，但只分化出根。陈振光 _l”等首次从花药培养 近几年来．研究比较多的为茶多酚和氨基酸的合成。小林利 中获得了植株。其中25％为单倍体，具有15条染色体；75％ 彰 E23 3、Matsuura 、矧 等早期研究了各种条件对茶氨酸细胞 的为亚倍体，具有18—22条染色体 _】 。郭玉琼等试验了不同 合成的影响。钟俊辉 等对愈伤组织培养中茶氨酸的积累 培养基与附加物对花药愈伤组织的影响，并且花药愈伤组织 进行了研究，合成茶氨酸的含量最高达170mg·g- 。成浩 研究 具备合成茶多酚的能力。 表明：在一个培养周期中，培养细胞的茶氨酸累积高峰出现