基于新型还原剂羊毛角蛋白的高效溶解.pdfVIP

基于新型还原剂羊毛角蛋 白的高效溶解 ／王江波等 ·7 ‘ 基于新型还原剂羊毛角蛋 白的高效溶解 王江波 ，刘建勇 ，王 洁 ，张玉荣 (1 天津工业大学纺织学院，天津 300160；2 天津工业大学先进纺织复合材料教育部重点实验室，天津 300160) 摘要 羊毛角蛋白的溶解已经有几十年的历史，但一直没有发现较好的溶解方法。首次将生化用新型精细二 硫键还原剂TCEP(三羧 乙基膦)应用于羊毛角蛋白的溶解。TCEP对二硫键有很强的选择还原性，与亚硫酸氢钠联 合使用，与以往的羊毛溶解方法相比有很大优势，使羊毛的溶解效率大大提高，溶解时间为5h时，溶解率达 96．3 。 通过红外测试推断，少量的不溶物为胱氨酸含量较高的高或超高硫蛋 白。角蛋 白浓度达 1O ，所制得的角蛋 白溶液 分子量在 3500D以上的达 8O ，8000D 以上的达 72 。通过凝胶 电泳分析，得到角蛋 白的主体分子量为 14000～ 2O000D。 关键词 羊毛 溶解 三羧乙基膦 亚硫酸氢钠 透析 凝胶电泳 红外 中图分类号：TQ340．61 文献标识码：A TheEfficientDissolution ofW oolBasedonNew Reductant WANGJiangbo，LIU Jianyong ，WANGJie，ZHANGYurong (1 SchoolofTextiles，TianjinPolytechnicUniversity，Tianjin300160；2 KeyLaboratoryofAdvancedTextileComposites， MinistryofEducation，TianjinPolytechnicUniversity，Tianjin300160) Abstract ThedissolutionoftheWOOlkeratinhasahistoryofsevera1decades．buthasnotfoundaneffective dissolutionmethod．A novelbiochemicaldisulfidereducingagent—TCEP(Tris(2-carboxyethy1)phosphine)wasapplied tothedissolutionofWOO1keratinforthefirsttime．TCEPhasastrongselectionofdisulfidereduction，andointuseof sodium bisulfite，thedissolutionofthepreviousmethodshavegreatadvantagesinwoo1．Theefficiencyofdissolution wasgreatlyimproved；dissolutiontimewas5h，dissolutionratewas96．3 ．ThroughF 卜IR，thesmallamountofin— solublematterwashighorultrahighsulfurproteinwhichhasahighcontentofcystinemaybe．Keratinconcentration was10 ，themolecularyieldofkeratinmorethan3500Dandmorethan8000Dwere80 and72 ．BySDS， thebodymolecularofthekeratinwas14000~ 20000D． Keywords WOO1，dissolution，TCEP，sodium bisulfite，dialysis，s】1) PAGE，FT—IR 羊毛角蛋 白是一种富含半胱氨酸(占总氨基酸 7％～ 剂，对还原二硫键选择性极强。传统的生化还原试剂(如 2O )的蛋白质，二硫键是 2个半胱氨酸的巯基被氧化形成 巯基乙醇和二硫苏糖醇)能有效还原二硫键，但不能在酸