分子生物学2009-2010-09-1-翻译-遗传密码与trna.doc

教学单元教案格式 第4章 翻译 之遗传密码与tRNA 课程教案 授课题目：第4章 翻译1 第一部分 遗传密码与tRNA 教学时数： 2 授课类型： 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 理解并掌握：遗传密码——三联子、tRNA的结构、功能与种类，核糖体的结构与功能， 蛋白质合成的过程蛋白质的运转机制 了解：氨基酰-tRNA合成酶 tRNA与酶结合的模型 tRNA的种类、延伸过程中的能量消耗 蛋白质前体的加工 第二套密码系统的概念和特征 教学重点： 重点阐明：蛋白质合成的过程反应体系、三种RNA在翻译中的作用、蛋白质合成过程可分为起始、延长、终止三个阶段。原核生物翻译起始与真核生物的区别。肽链合成后的加工修饰。蛋白质生物合成的干扰和抑制。 重点指出：终止因子的类型 教学难点： 本章难点：遗传密码的特性、翻译起始复合物的形成、肽链延长阶段的三个步骤、蛋白质的靶向输送 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 第讲转录过程信息从DNA转移至另一种结构上极为相似的核酸分子（RNA）的过程，翻译阶段遗传信息mRNA分子以三联子密码形式转移到结构极不相同的蛋白质分子存在解码机制。tRNA在蛋白质合成中处于关键地位，被称为第二遗传密码。它不但为将每个三联子密码翻译成氨基酸提供了接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供了载体。tRNA分子三叶草型顶端突起通过密码子：反密码子的配对与mRNA相结合，而其3’末端恰好将所转运的氨基酸送到正在延伸的多肽上。tRNA的L形高级结构反映了其生物学功能，因为它上所运载的氨基酸必须靠近位于核糖体大亚基上的多肽合成位点，而它的反密码子必须与小亚基上的mRNA相配对，所以两个不同的功能基团最大限度分离。 1. 翻译：指将mRNA链上的核甘酸从一个特定的起始位点开始，按每三个核甘酸代表一个氨基酸的原则，依次合成一条多肽链的过程。 蛋白质的生物合成，即翻译，以mRNA为模板形成蛋白质的过程，就是将核酸中由 4 种核苷酸序列编码的遗传信息，通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。 蛋白质的合成机制是最复杂的生物合成机制: 真核细胞中，蛋白质的合成需要： 70种以上的核糖体蛋白参与； 多于二十种的酶来激活氨基酸； 12种或更多的辅酶和其它专一性的蛋白因子来进行肽链合成的起始、延伸、和终止； 一百多种酶参与各类蛋白的最后修饰； 还需要多于四十种的tRNA和核糖体RNA。 蛋白质合成的场所是核糖体 蛋白质合成的模板是mRNA 模板与氨基酸之间的接合体是tRNA 蛋白质合成的原料是20种氨基酸 2.遗传密码 (genetic code) 遗传密码 (genetic code): DNA（或mRNA）中核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系。 三联子密码 mRNA链上每三个核甘酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这三个核苷酸就称为密码子或三联子密码(triplet coden) 。 三联子密码破译 1954年，物理学家George Gamov根据在DNA中存在四种核苷酸，在蛋白质中存在二十种氨基酸的对应关系 ，提出三个核苷酸为一个氨基酸编码是最理想的。因为在有四种核苷酸的条件下，64 （43=64）是能满足为20种氨基酸编码的最小数，这也符合生物体在亿万年进化过程中形成的和遵循的经济原则 。 至1966年，20种氨基酸对应的61个密码子和三个终止密码子全部被查清。 20种基本氨基酸的分类概图 3 密码子破译的研究实验方法 （1）在体外无细胞蛋白质合成体系中加入人工合成的多聚物（polyＵ）开创了破译遗传密码的先河。1961年，美国NIH的Nirenberg和Mathaei第一次确认了UUU是Phe的密码子 。随后他们又确定了AAA是Lys的密码子，CCC是Pro的密码子。 （2） 混合共聚物(mixed copolymers)实验对密码子中碱基组成的测定 1963年，Speyer和Ochoa等发展了用两个碱基的共聚物破译密码的方法。例如以A和C原料，合成polyAC。但这个方法不能确定碱基的排列方式，而只能显示密码子中碱基组成及组成比例。另外，通过反复改变共聚物成份比例的方法亦十分麻烦和费时。 （3） aa-tRNA与确定的三核苷酸序列(密码子)结合（核糖体结合技术） （4）用重复共聚物(repeating copolymers)破译密码 Jones，和Kho