生物医学电镜技术-2014级研究生.ppt

纳米级和微米级颗粒的形貌观察和尺寸计算。 纳米技术及自组装技术在生物医学上的应用：靶向药物、缓释药物的设计；具有新型医学、医疗功能材料的开发。 纳米纤维 各种纳米颗粒或纳米晶 高分子微球的SEM观察 包容了药物的高分子微球：具有良好的药物控制释放作用。 高分子海绵样品的SEM观察 多孔结构和类似通道一样的微观结构 四　原子力显微镜 （Atomic Force Microscope, AFM) 1 基本原理和方法(原子力) （1） 基本原理：原子力显微镜是将一个对微弱力极敏感的微悬臂一端固定，另一端有一个微小的针尖，其尖端原子与样品表面原子间存在极微弱的排斥力（10–8 ~ 10–6 N），利用光学检测法或隧道电流检测法，通过测量针尖与样品表面原子间的作用力获得样品表面形貌的三维信息。当针尖接近样品时，将受到力的作用使悬臂发生偏转或振幅改变。悬臂的这种变化经检测系统检测后转变成电信号传递给反馈系统和成像系统，记录扫描过程中一系列探针变化可获得样品表面信息图像。 AFM原理图 AFM结构图 扫描器：AFM依靠扫描器控制对样品扫描的精度 反馈系统：AFM有力恒定方式和高度恒定两种基本方式。 力恒定方式（Constant-Force Mode）：设置样品与针尖之间作用力恒定（悬臂弯曲度不变），记录x、y方向扫描时z方向扫描器的移动来获得样品的表面形态； 高度恒定方式（Constant-Height Mode）：针尖相对于样品的高度一定，记录扫描器在z方向的运动而成像，该方法适于观察原子、分子的图像。 （2）仪器组成 多种方法检测：光反射法、光干涉法、隧道电流法、电容检测法等。 （3）成像模式 接触模式（Contact Mode）：是指原子力显微镜的探针与试样相互接触、相互作用力位于F/S曲线的斥力区。 非接触模式（Non-contact Mode）：是指原子力显微镜的探针与试样保持一定的空间距离，相互作用力位于F/S曲线的引力区。 共振模式（Tapping Mode）：是指悬臂在z方向驱动共振，控制振幅在一恒定值，记录z方向扫描器的移动而成像，针尖与样品可以接触，也可以不接触，适用于易形变的软质样品。 （4）相关技术 （1）侧向力显微镜（Lateral Force Microscopy，LFM）： （2）扫描粘弹性显微镜（SVM）： （3）磁力显微镜（Magnetic Force Microscopy，MFM）： （4）静电力显微镜（Electrostatic Force Microscopy， EFM）： （5）化学力显微镜（Chemical Force Microscopy, CFM）： （6）激光力显微镜(LFM)、表面电位显微镜(SEPM)、力调制显微镜(Force Modulation Microscopy, FMM)和相检测显微镜(Phase Detection Microscopy, PDM)等等，纳米压痕技术(Nanoindentation)和纳米加工技术(Nanolithography)。 2 原子力显微镜的应用 AFM图（左）和图上直线所对应位置的二维图 AMF下的高分子链形态，可提供链参数：链的长短、直径、形态等。 球状晶体生长过程的AFM图 能否由此而观察细胞的动态生长过程呢？提示外力因素如机械力、生长因子对细胞生长过程的影响？ 　　AFM应用于红细胞病理学检验的初步研究 　　红细胞来源：正常人、肺癌病人和骨髓增生异常综合症等病人； 　　结果：获得了多个红细胞、单个红细胞和细胞膜表面微观结构清晰的形貌图像； 　　结论：发现肺癌病人大多数红细胞呈棘刺状 ,每个细胞共有 1 0 - 2 0个棘刺状突起 ,大部分突起在细胞的边缘 ,中央有少量突起。细胞边缘的棘刺比中央的棘刺要宽 ,但较短 ,平均宽度约为 589 0nm ,平均长度约为 646 7nm。 　　AFM在细胞生物学领域的主要应用可归结为: 　观察细胞形态及细胞表面局部的物理特征; 　观察细胞超微结构; 　监测细胞细胞骨架变化; 　观察测定细胞间的相互作用力及其作用过程; 　观察细胞表面的抗原-抗体反应; 　研究细胞在病理或生理条件下的生物过程。 显微镜家族 普通光镜：1665年，罗伯特·胡克，提出“细胞”概念。 荧光显微镜： 共聚焦显微镜： 透射电镜：1931-38年，Max Knoll和Ernst Ruska，第一台TEM。 扫描电镜：1952-56年，Charles Oatley，第一台SEM。 X-射线能谱仪： 扫描探针显微镜：用扫描探针显微镜可操纵原子。 扫描隧道显微镜： 1983年，IBM公司苏黎世实验室的两位科学家Gerd Binnig和Heinrich Rohrer发明了扫描隧道显微镜（STM） 环境扫描电镜： 新