第2章 环境中的微生物-原核基本结构1.ppt

第2章 环境中的微生物----原核微生物 第六节 原核生物的结构 （参见细菌的细胞结构P25-32） 细菌的染色 由于细菌的细胞极其微小又十分透明，因此用水浸片或悬滴观察法在光学显微镜下进行观察时，只能看到大体形态和运动情况。若要在光学显微镜下观察其形态和主要构造，一般都要对它们进行染色。 革兰氏染色法分为初染、媒染、脱色和复染四步。 革兰氏染色法 革兰氏染色的意义 通过这一染色，可把几乎所有的细菌分成革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两个大类。因此是分类鉴定的重要指标。 这两类细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异，因此任何细菌只要先通过很简单的革兰氏染色，即可提供不少其他重要的生物学特性方面的信息。 革兰氏染色机理 1.与细菌等电点有关 革兰氏阳性菌的等电点为pH2~3，革兰氏阴性菌的等电点为pH4~5。革兰氏阳性菌的等电点比革兰氏阴性菌低，说明革兰氏阳性菌带的负电荷比革兰氏阴性菌多。它们与草酸铵结晶紫的结合力大，用碘-碘化钾媒染后，两者的等电点均得到降低，但革兰氏阳性菌的等电点降低的多，故与草酸铵结晶紫结合得更牢固，对乙醇脱色的抵抗力更强。 2.与细胞壁有关 革兰氏阳性菌的脂类物质的含量很低，肽聚糖的含量高。革兰氏阴性菌相反，用乙醇脱色时，革兰氏阴性菌的脂类物质被乙醇溶解，增加细菌细胞壁的孔径及其通透性，乙醇容易进入细胞内将草酸铵结晶紫和碘-碘化钾复合物提取出来，使菌体呈现无色。革兰氏阳性菌由于脂类物质含量极低，而肽聚糖含量高，乙醇既是脱色剂又是脱水剂，使肽聚糖脱水缩小细胞壁的孔径，降低细胞壁的通透性，阻止乙醇分子进入细胞，草酸铵结晶紫和碘-碘化钾的复合物被截留在细胞内而不被脱色，仍呈现紫色。 肽聚糖单体结构 a. 双糖单位：N-乙酰氨基葡萄G，N-乙酰胞壁酸M，两者通过 β-1，4糖苷键相连，形成肽聚糖骨架。 b. 四肽尾：由4 个氨基酸组成的短肽链连接N-乙酰胞壁酸上，四 个氨基酸分别为L-Ala（丙），D-Glu（谷），L- Lys （赖），D-Ala（丙）。 c.肽桥：甘氨酸五肽，肽桥的氨基端与前一肽聚糖单体肽尾中的第 四个氨基酸（D-Ala）相连，它的羧基端与后一肽聚糖单 体尾中的第三个氨基酸（L-Lys）相连，而从把前后两个 肽聚糖单体连接。 四 肽 尾 Overall Structure of the Gram-positive Cell Wall Teichoic acid: 磷壁酸 （3）G—菌的细胞壁(E.coli) 　 G—菌细胞壁比较薄，有外壁层(外膜)和内壁层两层结构，外壁层由脂多糖、脂蛋白和磷脂构成，内壁层由肽聚糖单体构成，不含磷壁酸，肽聚糖含量低，约为5~10%，在外壁和细胞膜之间的空间，称为壁膜间隙（周质空间）。 四 肽 尾  Lipopolysaccharide（脂多糖） 脂多糖 G-特有的 位于外壁外层 是一类 厚度8~10nm 类脂+各种多糖 （4）? G+ 与G— 细胞壁结构与化学成分的比较 1） 肽尾组成不同： 第三个氨基酸 G+ ：L—Lys,G—：m—DAP 2）交联度与交联方式不同 G+ 短肽都通过肽桥相连，交连四肽达到75%. G—并不是所有短肽都交联，短肽间没有肽桥，交联四肽25%, 所以G+ 网状紧密，G—网状稀疏。 3） 细胞壁构造与组成不同 G+ 单层壁厚，90%肽聚糖，还有10%磷壁酸。 G—内外两层，内壁层肽聚糖10%，外壁层由脂多糖，脂蛋白， 和磷脂构成。 GRAM NEGATIVE CELL WALL GRAM POSITIVE CELL WALL 溶菌酶、青霉素对细菌细胞壁的作用 青霉素杀细菌 Penicillin kills bacteria by interfering with the ability to synthesize cell wall. In this sequence, Escherichia coli were incubated in penicillin for 30 minutes. The bacteria lengthen, but cannot divide. Eventually the weak cell