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相差显微镜02重点讲义
实验十相差显微镜观察共混物的结构形态 为了获得理想的高分子材料 对聚合物进行改性(物理共混) 多相体系具有微观或亚微观的多相形态 电子显微镜和相差显微镜 二、实验原理 1、有关光学显微镜的一些重要参数 2、相差显微镜的工作原理 对于折光指数不同的聚合物,将其共混物的位相差别转换成振幅差别,从而观察共混物结构形态,分辨出分散相材料并测定相域尺寸 2、影响因素 三、观察仪器和样品 xs-BI型生物显微镜(江南光学仪器厂),放大倍数32-1600倍。附带相衬装置与摄影装置,采用正相差。 样品为 (PS/SBR) (PS/PVC) 共混物。 四、制样方法 1、切片法 2、压片法 3、蚀镂法 五、实验步骤 1、采用压片法制样。将制好的标本切片安放在载物台上,并用卡片夹卡住。 2、接通电源 3. 调节双目观察筒的距离,使其与观察者瞳孔距离一致,并调节双目镜筒上的刻度,使其与瞳孔距离标尺的刻度一致。 4、调节载物台纵向横向移动手轮,将标本移至视场,转动粗调微调手轮, 看清晰 5. 转动视场光栏调节手轮,控制被观察物体的照明范围与观察视场大小一致。 6、用目镜测微计来观察相域尺寸。测量时 只要读出被测物体所对应的格数,就可以换算出相域尺寸。 7. 取下样品,关闭各电源开关 六、注意事项 显微镜的放置 压片尽量薄, 不可用力过大 保持镜头干净 七、结果讨论 根据观察到的共混物结构形态。说明其属于海岛结构?两相连续结构还是两相互锁结构? 分散相的相域尺寸多大?讨论其分散情况,表明放大倍数。 * * 指导老师: 王新 一、实验目的 1、了解掌握相差显微镜的工作原理及使用 2、掌握压片制样方法 3、观察分析共混物的结构形态,相域尺寸 物镜的性能参数:一般在物镜的侧壁上(见图10-1).其中数值孔径(N.A)是标本与物镜前透镜之间介质的折射率(n)与物镜孔径角(即光锥半顶角u)的正弦的乘积, N.A= nSinu,图10-2所示。 分辨力和最小分辨距离 ? :显微镜的分辨力是指分辨两个物点之间最短距离的能力。显微镜的分辨力大小的参数是最小分辨距离,它是指物镜可以分辨的两个物点之间的最小距离。 (1)振幅物体和位相物体 我们称引起振幅变化的物体为振幅物体(或幅光栅);称引起位相变化的物体为位相物体(或相光栅)。 振幅的变化可以由人的眼睛觉察,也可形成感光材料上的反差,但位相的不能。无色透明的生物切片,晶片或高分子共混物切片属于位相物体。 如何将这种无法观察的位相变化转变成能够观察的振幅变化,用来调制象面上的光强分布,正是相差法(又称相衬法)试图解决的问题。 解决方法:在物镜的后焦面处安置一块位相板。其作用是使透过光中的零级衍射光(中心亮斑)的位相实现 λ/4或3λ/4的位移,从而在象平面上出现与标本的位相信号相关的光强分布。 (2)相差显微镜的光路图 为了获得很好的分辨率,照明系统的孔径经常做成环形,而不是圆形。与此对应的物镜后焦面上的位相板的镀层,也不是一个中心圆心,而是环形镀层。 泽尔尼克 1953年泽尔尼克因此获诺贝尔物理学奖 环形光栏 位相板 s I 将位相板放置在显微镜的后焦面上,当作一个空间滤波器。在相干光的照射下,像面上出现与物的位相信息相关的图像。像面上的强度分布与样品位相成线性关系,也就是说,样品的位相分布调制了像面上的光强 (1)染色标本的影响 (2)标本厚度的影响 (3)盖玻片和载玻片的影响
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