4.14.2酸碱滴定法测蛋白质含量选读.ppt

第4章 化学分析法 1. 定义：以物质进行化学反应为基础的分析方法。 4.2 酸碱滴定法 一.蛋白质的特点 1.蛋白质组成 蛋白质是复杂的含氮有机化合物，它的溶液是典型的胶体分散体系，由两性氨基酸通过肽键结合在一起的大分子化合物，它主要含的元素是C 、H、O、N、S、P另外还有一些微量元素Fe、Zn、I、Cu、Mn。 2.氨基酸的组成 目前各种氨基酸已有一百多种，但是构成蛋白质的氨基酸主要是其中的20种，氨基酸是由脂肪酸碳链上的氢原子被NH2-所置换而得到的。 二. 蛋白质换算系数 一份氮素相当于蛋白质的份数 一般蛋白质含氮为15-18%,通常取16%，故换算系数常采用6.25。因食品种类不同，差别是很大的. 4.2.4 甲醛滴定法测定总氨基酸含量 1.实验原理: ? 甲醛滴定法测定总氨基酸含量 2.试剂: 甲醛滴定法测定总氨基酸含量 3.操作步骤： ??? 加样品溶液2.0mL和蒸馏水5.0mL,加中性甲醛溶液5mL→加0.05%溴麝香草酚蓝乙醇溶液2滴和0.5%酚酞乙醇溶液4滴→用0.1 mol/L NaOH标准溶液滴定至紫色(pH值为8.7-9.0），并作空白实验. 4.2.5 凯氏(Kjeldahl)定氮法 凯氏(Kjeldahl)定氮法 凯氏(Kjeldahl)定氮法 二. 微量凯氏定氮法? 消化 蒸馏和吸收 滴定 计算 3.微量凯氏定氮蒸馏装置 微量凯氏定氮蒸馏装置（实物图） 4.操作步骤 （1）消化： 称样→送入凯氏烧瓶底部→加催化剂和H2SO4(浓）→消化完全至溶液呈透明的蓝绿色→继续消化30min →冷却→加水→冷却至室温 →定容至100mL →摇匀 （2）蒸馏与吸收： 将接收瓶（硼酸溶液+指示剂）置于冷凝管下端→准确移取消化液10mL于反应管→少量水冲洗漏斗→加 NaOH溶液10mL →关闭漏斗、水密封→蒸馏→溶液变绿后继续蒸馏5min →降低接收瓶再继续蒸馏 1min →水冲洗冷凝管下端→取下接收瓶用HCl滴定。 5.计算 * * 化 学 分 析 酸碱滴定 配位滴定 氧化还原滴定 沉淀滴定 重量分析 滴定分析 定性 分 析 定量 分 析 蛋白质类化合物的测定 一.蛋白质的特点 二.蛋白质类化合物的测定方法 4.2.4 甲醛滴定法测定总氨基酸含量 4.2.5 凯氏定氮法 用碱完全中和-COOH基时的pH值为8.4-9.2 （1）40%中性甲醛溶液： （2）0.5%酚酞乙醇溶液。 (3) 0.05%溴麝香草酚蓝乙醇溶液。 （4）0.1 mol/L NaOH标准溶液。 4.计算 该混合指示剂在酸性下呈红色，中性下呈灰色，碱性下呈绿色 主要装置 1. 方法原理? 同常量凯氏定氮法 2.步骤: 微量凯氏定氮蒸馏装置（于仪器中）