阿莫西林聚合物测定法（草稿）.PDFVIP

附件： 阿莫西林聚合物测定方法的质量标准（草稿）与研究资料 阿莫西林聚合物测定法 （草稿） 阿莫西林聚合物 照分子排阻色谱法 中国药典 年版二部附录Ⅴ 测 ( 2005 H) 定 色谱条件与系统适用性试验 用葡聚糖凝胶 ～ μm)为填充 G-10(40 120 剂,玻璃柱（1.0×30cm）,流动相A 为pH8.0 的0.05mol/L 磷酸盐缓冲液(取 0.05mol/L 磷酸氢二钠95ml 和0.05mol/L 磷酸二氢钠5ml,混合均匀，滤过)。 流动相B 为水,流速每分钟 1.5ml,检测波长为254nm, 量取0.2mg/ml 蓝色葡 聚糖2000 溶液 100 μl, 注入液相色谱仪, 分别以流动相A,B 进行测定，记 录色谱图。按蓝色葡聚糖 2000 峰计算理论板数均不低于 500,拖尾因子均应 小于 2.0。在两种流动相系统中蓝色葡聚糖 2000 峰的保留时间比值应在 0.93～1.07 之间，对照溶液主峰与供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中 蓝色葡聚糖2000 峰的保留时间的比值均应在0.93～1.07 之间。称取阿莫西 林约0.2g 置 10ml 量瓶中，加2%无水碳酸钠溶液4ml 使溶解后，用0.3mg/ml 的蓝色葡聚糖2000 溶液稀释至刻度，摇匀。量取 100 μl 注入液相色谱仪， 用流动相A 进行测定，记录色谱图。高聚体的峰高与单体与高聚体之间的谷 高比应大于2.0。另以流动相B 为流动相，精密量取对照溶液100 μl,连续进 样5 次,峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。 对照溶液的制备 取青霉素对照品适量，精密称定，加水溶解并定量制 成每1ml 中约含青霉素0.2mg 的溶液。 测定法 取本品约0.2g, 精密称定，置 10ml 量瓶中，加2%无水碳酸 钠溶液4ml，使溶解后，用水稀释至刻度，摇匀。立即精密量取100 μl 注入 液相色谱仪,以流动相A 为流动相进行测定,记录色谱图。另精密量取对照溶 液100 μl 注入液相色谱仪，以流动相B 为流动相进行测定，记录色谱图。按 外标法以峰面积计算，结果除以 10, 即得,含阿莫西林聚合物以阿莫西林计 不得过0.15% (阿莫西林: 青霉素=1: 10)。 1 方法的研究与验证 1.流动相的选择 照2005 年版药典阿莫西林高分子聚合物项下; 流动相A : pH8.0 的0.05mol/L 磷酸盐缓冲液(取0.05mol/L 磷酸氢二钠 95ml 和0.05mol/L 磷酸二氢钠5ml,混合均匀，滤过)。 流动相B : 水, 2.检测波长: 254nm, 3. 分离度试验 根据药典附录ⅤH 分子排阻色谱法规定，高分子杂质检 查时，某些药物分子单体与其聚合体不能达到基线分离时，其分离度计算公 式为 R=高聚体的峰高/单体与高聚体之间的谷高＞2.0 分离度试验溶液 由于高分子聚合物的对照品不易获得，而样品中的高 聚物又极少，在配制分离度溶液时，适当的加入蓝色葡聚糖2000，使聚合 物的峰增大，一般蓝色葡聚糖2000 的加入量是使聚合物峰面积达到规定限 度的1～2 倍。 称取阿莫西林约0.2g 置10ml 量瓶中，加2%无水碳酸钠溶液4ml 使溶解 后，用 0.3mg/ml 的蓝色葡聚糖 2000 溶液稀释至刻度，摇匀。量取 100 μl 注入液相色谱仪，用流动相A 进行测定，记录色谱图进行分析，得高聚物峰 的含量为0.26% （规定限度为0.15%），分离度为2.53。（附图） Manual Run 5:1_UV Manual Run 5:1_EditedBaseline mAu 15.0 10.0 6.54 5.0 0.0