实验七 植物在不同环境条件下的膜透性.docVIP

实验七 植物在不同环境条件下的膜透性 植物细胞膜对维持细胞的内环境和细胞的代谢起着重要的作用。正常情况下，细胞膜对物质有选择透过的能力。当植物受到高温、低温、干旱、盐渍、病原菌等作用后，细胞膜会有不同程度的损坏，膜透性增大，细胞内电解质外渗，致使细胞浸提液电导率增大，细胞内糖、蛋白质等外渗，致使细胞浸提液呈各种显色反应。 电导法是比较环境因子胁迫作用、鉴定植物抗逆性的精确而实用的方法。 一、目的 掌握电导仪的使用方法。 学习分析逆境与植物生理变化的相关性。 二、仪器设备 DDS—12A型数字式电导仪、722分光光度计、精密扭力天平、培养箱、真空干燥器、抽气机、恒温水浴锅。 剪刀、电炉、纱布、镊子、滤纸。 NaCl、蒽酮试剂。 三、实验材料 各种当季植物。 四、实验步骤 1、选取同种待测植物一定部位上生长叶龄相近的叶子若干，剪下，纱布拭净，称取三份，各重2g。 2、一份插入盛水的小烧杯，置于室温下，作对照处理，另二份作逆境处理：一份放入无水小烧杯，放在40℃恒温箱内，一份放入无水小烧杯，放在0～4℃冰箱内。 3、1h后，将植物叶片用蒸馏水冲洗两次，用洁净滤纸吸干，剪成约1cm2的小块，分别放入小烧杯中，用干净尼龙网压住，浸没在准确加入的20ml蒸馏水下。 4、小烧杯放入真空干燥器，用抽气机抽气8min；抽出细胞间隙中的空气后，再缓缓放入空气，将水压入细胞间。 5、将抽过气的小烧杯取出，静置20min浸提，用玻棒轻轻搅动，待浸提液静止后，在20～25℃恒温下，测定浸提液电导率，在NaCl—电导率标准曲线上查得电解质浓度。将结果记入表10-6-1内，比较分析。 6、吸取1mL浸提液加入试管中，加入蒽酮试剂5mL，于沸水浴中加热10min，冷却，测定吸光度，在糖—蒽酮显色吸光度标准曲线上查得糖浓度。将结果记入表10-6-1内，比较分析。 表10-6-1 不同环境条件作用下的叶片组织浸提液有关指标值 处理 电导率 吸光度 电解质浓度 糖浓度 0～4℃、干燥 室温 40℃、干燥 ☆制作NaCl—电导率标准曲线： 用纯NaCl配成0、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、60 mg/L、80 mg/L、100mg/L的系列溶液，在20～25℃恒温下测定其电导率，得NaCl—电导率标准曲线。 ☆制作糖—蒽酮显色吸光度标准曲线： 用葡萄糖配成0、25 mg/L、50 mg/L、75 mg/L、100 mg/L、120 mg/L、150mg/L、200mg/L的系列溶液，分别吸取1mL葡萄糖溶液放入干洁试管，加蒽酮试剂5mL，于沸水浴10min，冷却，600nm测吸光度，得糖—蒽酮显色吸光度标准曲线。 五、讨论 什么环境条件对植物的胁迫作用强一些？其致膜透性变化的机理如何？ 为什么用NaCl和葡萄糖作为评价膜透性的物质？它们分别代表细胞质的什么成分？ 还可以用哪些指标评价膜透性，进而评价抗逆性？ 1