植物组织培养技术（高教版）电子教案：植物组织培养操作技术02.docVIP

第2章 植物组织培养技术 第三节 植物组织培养操作技术（2） 一、授课章节 二、学时安排 2学时 三、教学目标 1．掌握培养基的作用。 2．掌握培养基中生长调控物质的作用。 3．了解培养基的类型。 四、教学重点、难点分析 重点： 培养基的基本成分。 难点： 培养基中生长调节物质的作用。 五、教具 电化教学设备、教学方法 讲授法，。 、教学过程 Ⅰ.导入 II.新课 2.常用培养基的配方和特点 目前已公开报道的基本培养基有许多种类，各有不同的特点和适用范围，在植物组织培养生产中应根据不同的植物种类和培养部位及不同的培养目的选用不同的培养基。 常用的培养基配方： 表1 常用培养基配方 MS（1962） B5（1968） White （1943） SH （1972） Knudson C （1946） VW （1949） N6 （1974） (NH4)2S04 NH4N03 KN03 Ca(N03)2·4H20 CaCl2·2H20 Ca3(PO4)2 1650 l900 440 134 2500 150 80 200 2500 200 500 1000 500 525 200 463 2830 166 MgS04?7H20 KH2PO4 NaH2P04?H20 Na2SO4 Na2—EDTA 370 170 37.3 250 150 37.3 720 17 200 400 15 250 250 250 250 185 400 37.3 FeSO4?7H20 Fe2(SO4)3 KCl Fe2(C4H4O6)3 27.8 27.8 2.5 65 20 25 28 27.8 NH4H2PO4 MnSO4?H20 MnS04?4H20 ZnSO4?7H20 H3B03 KI Na2Mo04?2H20 MoO3 CuSO4?5H20 CoCl2?6H20 22.3 8.6 6.2 0.83 0.25 0.025 0.025 10 2.0 3.0 0.75 0.25 0.025 0.025 5 3 1.5 0.75 0.001 0.01 300 10 1.0 5.0 1.0 0.1 0.2 0.1 7.5 7.5 4.4 3.8 1.6 0.8 盐酸硫胺素VBl 烟酸 盐酸吡哆醇VB6 肌醇 甘氨酸 0.1 0.5 0.5 100 2.0 10 1.0 1.0 100 0.1 0.3 0.1 3 5.0 5.0 5.0 1000 1 0.5 0.5 2 蔗糖 pH 30000 5.8 20000 5.5 20000 5.6 30000 5.8 20000 5.8 20000 5.5 50000 5.8 表2 常用基本培养基的特点 基本培养基种类 设计由来 特点 适用范围 MS 1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计 无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液；它的硝酸盐和铵盐含量较其他培养基为高，比例也比较合适，不需要添加更多的有机附加物。 广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养 B5 1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计 除含有较高的钾盐外，还含有较低的氨态氮和较高的盐酸硫胺素 适合双子叶植物，尤其木本植物的培养 White 1943年由White为培养番茄根尖而设计 无机盐数量较低，提高了MgSO4的浓度 适于生根培养 SH 1972年由Schenk和Hidebrandt设计 盐分浓度较高，铵态氮含量较低，盐酸硫胺素和硝酸钾含量较高 在不少单子叶和双子叶植物的组培中应用效果较好 Knudson C 1922年由Knudson为兰科种子培养而设计，后经多次改良 成分简单，不能满足大多数植物组织细胞的生长发育所需的营养物质 适用于兰科植物种子培养和萌发 VW Vacin 和Went 在1949年设计 培养基的总离子强度稍低些，磷以磷酸钙的形式供给 适用于气生兰的组培 N6 1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计 成分较简单，KN03和(NH4)2S04含量高 适用于单子叶植物花药培养，广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养 （三）培养基的组成 培养基主要有水、无机盐、有机物、植物生长调节物质、培养基的支持材料五大类组成。 1.水 水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。它是生命活动过程中不可缺少的物质。配制培养基母液时要用蒸馏水，以确保母液及培养基成分的精确性，防止贮藏过程发霉变质，大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。 2.无机元素 (1)大量元素指浓度大于0.5 mmol／L的元素