2甜叶菊提取物标准（公示稿）.DOC

甜叶菊提取物 Tianyeju Tiquwu Stevia Leaf Extract 本品为菊科、甜叶菊属Stevia rebaudiana (Bertoni) Hemsl的叶子经纯化干燥的提取物。 【性状】本品为浅黄色至白色粉末或晶体；味浓甜微苦。 本品在乙醇中溶解，在水中微溶。 【鉴别】HPLC特征图谱 照高效液相色谱法（通则Y04）测定 混合对照品溶液的制备 分别称取适量甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷对照品，置于同一个量瓶中，用30%乙腈水溶液完全溶解后定容，制成每1mL约含0.04mg的混合对照品溶液。 供试品溶液 取本品粉末约25mg，精密称定，置25mL量瓶中，用30%乙腈水溶液溶解后稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 色谱条件 以十八烷基键合硅胶填充柱（LUBEX KromaSil C18，4.6(250mm，5μm）或等同类型柱；以乙腈-磷酸钠缓冲液（pH 2.6，称取1.20g磷酸二氢钠溶于800mL水中，用磷酸调节pH至2.6，用水稀释至1000mL）（30:70，v/v）为流动相；柱温40℃；流速1.0mL/min；检测波长为210nm。理论板数按瑞鲍迪苷A峰计算应不低于3000。 测定 分别精密吸取混合对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。 供试品特征图谱中应有甜菊糖苷和瑞鲍迪苷A两个主峰与对照品溶液的色谱峰相对应。以瑞鲍迪苷A为参照峰，甜菊苷特征峰的相对保留时间1.07。相对保留时间的允许误差范围应在±5%之内。 图1 混合对照品溶液参考色谱示意图 图2 甜叶菊提取物 【含量测定】 照高效液相色谱法（通则Y04）测定 混合对照品溶液的制备 同【鉴别】HPLC特征图谱。 对照品溶液的制备 分别取甜菊苷和瑞鲍迪苷A对照品适量，加30%乙腈水溶液制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 同【鉴别】HPLC特征图谱。 色谱条件与系统适用性 同【鉴别】HPLC特征图谱。 测定 分别精密吸取混合对照品溶液、对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定。分别对混合对照品溶液、对照品溶液和供试品溶液进行色谱分析。将供试品溶液的色谱图与混合对照品溶液的色谱图相比较，以确定供试品溶液色谱图中各组分对应的峰。记录供试品溶液色谱图中甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷的峰面积及对照品溶液色谱图中甜菊苷和瑞鲍迪苷A的峰面积。 瑞鲍迪苷A含量（以干基计）的质量分数wa按公式E.1计算。 …………………………（E.1） 式中：mR——瑞鲍迪苷A标准溶液中瑞鲍迪苷A的质量（以干基计，mg）； m——供试品溶液中供试品的质量（以干基计，mg）； Aa——供试品溶液色谱图中瑞鲍迪苷A的峰面积值； AR——瑞鲍迪苷A标准溶液色谱图中瑞鲍迪苷A的峰面积值。 其他8种糖苷含量（以干基计）的质量分数wi按公式（E.2）计算。 ……………………（E.2） 式中：i——s、b、c、d、f、da、ru、sb，分别对应甜菊苷、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷； mS——甜菊苷标准溶液中甜菊苷的质量（以干基计，mg）； m——供试品溶液中供试品的质量（以干基计，mg）； fi——i组分与甜菊苷的式量比值：1.00（甜菊苷）、1.00（瑞鲍迪苷B）、1.18（瑞鲍迪苷C）、1.40（瑞鲍迪苷D）、1.16（瑞鲍迪苷F）、0.98（杜克苷A）、0.80（甜茶苷）、0.80（甜菊双糖苷）； Ai——供试品溶液色谱图中i组分的峰面积值； AS——甜菊苷标准溶液色谱图中甜菊苷的峰面积值。 由上述公式（E.1）和（E.2）计算得到9种组分的含量wa、ws、wb、wc、wd、wf、wda、wru和wsb，取各组分含量之和即为供试品中甜菊糖苷含量。 按干燥品计算，本品含甜菊苷（C38H60O18）、瑞鲍迪苷A（C44H70O23）、瑞鲍迪苷B（C38H60O18）、瑞鲍迪苷C（C44H70O22）、瑞鲍迪苷D（C50H80O28）、瑞鲍迪苷F（C43H68O22）、杜克苷A（C38H60O17）、甜茶苷（C32H50O13）、甜菊双糖苷（C32H50O13）的总量，不少于85.0%。 【检查】 粒度 按照粒度测定法（通则Y07）测定，80目筛通过率不得少于95%。 水分 按照水分测定法（通则Y08）测定，不得过6.0%。 灰分 按照灰分测定法（通则Y09）测定，不得过1.0%。 甲醇、乙醇残留物 照残留溶剂测定法（通则Y10）测定，本品含甲醇不得过200 mg/kg，含乙醇不得过5000mg/kg。 重金属及有害元