丝苏氨酸激酶Pim-3经STAT3信号通路对人肝癌细胞凋亡影响的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 目的： 探讨丝苏氨酸激酶/ Pim-3基因对人肝癌细胞HepG2自身生长的影响，并揭示 STAT3信号通路在此过程中发挥的作用。 方法： Pim-3 RNA Pim-3shRNA 将人工合成的靶向 基因的短发夹 （ ）和阴性对照短 TM 发夹RNA （阴性对照shRNA）的真核表达质粒借助Lipofectamine 2000转染入 人肝癌细胞HepG2中。实验分4组，分别为Pim-3shRNA组、阴性对照组、脂质 4 体转染对照组 （脂质体组）、空白对照组。 组细胞给予相应的处理后，应用流 式细胞仪检测4组肝癌细胞的凋亡情况，逆转录-聚合酶链法（RT-PCR）检测4 组肝癌细胞中Pim-3mRNA的表达情况，蛋白质印迹法（WesternBlot）检测4组 Pim-3 STAT3 pSTAT3Tyr705 Bcl-xL Bad pBadSer112 肝癌细胞中 、 、 、 、 、 等相关蛋白 的表达情况。 结果： 3 Pim-3shRNA 与空白对照组、脂质体组和阴性对照组 组相比较， 组细胞凋亡 Tyr705 Ser112 率升高，且 Pim-3、pSTAT3 、Bcl-xL、pBad 蛋白及Pim-3mRNA相对表 达量下降，STAT3、Bad蛋白在4组肝癌细胞中的相对表达量无明显差异。 结论： Tyr705 Ser112 沉默Pim-3基因表达可通过下调pSTAT3 和pBad 蛋白的表达促进肝 癌细胞的凋亡，提示Pim-3可以作为药物抗肿瘤的靶点。 关键词：丝/苏氨酸激酶Pim-3；肝肿瘤；STAT3；凋亡 II 万方数据 Abstract ABSTRACT Objective： This study aimedto investigate the e ects o serinethreonine kinase Pim-3 on thegrowtho HepG2cellsandtoexploretheroleo STAT3signalingpathway. Methods： Synthetic Pim-3shRNA and negative control shRNA were independently TM transfected into HepG2 cells in the presence o Lipofectamine 2000. C