HPLC培训教材2教程.ppt

流动相导论 溶剂系统 可以是一种或多种水溶液 或有机溶剂 携带样品流经色谱柱至检测器 当与样品发生相互作用时，样品则发生分离 选择溶剂需考虑的问题 极性与溶剂强度 纯度、过滤、除气 与其他溶剂的互溶性 缓冲溶液与pH 等梯度或梯度洗脱分析 流动相的要求 ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。 ②纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。 ③必须与检测器匹配。使用UV检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收，或吸收很小。当使用示差折光检测器时，应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相，以提高灵敏度。 ④粘度要低（应2cp）。高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压降增加，使分离时间延长。最好选择沸点在100℃以下的流动相。 ⑤对样品的溶解度要适宜。如果溶解度欠佳，样品会在柱头沉淀，不但影响了纯化分离，且会使柱子恶化。 ⑥样品易于回收。应选用挥发性溶剂。 HPLC用水 HPLC用水 HPLC应用中要求超纯水，如检测器基线的校正和反相柱的洗脱。 进行HPLC、GC、电泳和荧光分析，或在涉及组织培养时，没有有机物污染是非常重