OGR1籍ERK信号通路参与酸性微环境致气道上皮细胞黏蛋白5AC表达.pdfVIP

中国医科大学学报第43 卷第2期 2014年2 月 122. Journal of China Medical University Vol.43 No.2 Feb.2014 ·论著· OGR1 籍ERK信号通路参与酸性微环境致气道上皮细胞 黠蛋白5AC表达 周万l ，周向东 1 ，尤列·皮尔曼2 ，维克多·科罗索夫2 (1重庆医科大学附属第三医院呼吸内科，重庆 400010; 2 俄罗斯医学科学院远东呼吸生理与病理中心，布拉戈维申斯克 675000) 摘要 目的探讨气道酸性微环境诱导气道上皮细胞和蛋白5AC 表达的上游信号通路调节机制。方法体外培养人气道上 皮细胞(l6HBE) ，以氯化氢创造细胞酸性环境(pH 6.4)，以细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂 PD88059及卵巢癌G蛋白 祸联受体1 (OGR I) siRNA 进行千于页，将细胞随机分为 8 纽:对照纽、酸刺激纽、酸刺激+转染 OGRl siRNA 组、pH 7.4+0GR1 siRNA组、酸刺激+阴性siRNA 组、pH 7.4+阴性siRNA 纽、酸刺激+PD98059 组、pH 7.4+PD98059 组。采用 RT-PCR、 ELISA 法分别 观察细胞毒占蛋白 (MUC)5AC 转录水平及培养上清液中MUC5AC蛋白水平的改变;Westem b10t 法检测 OGR1 蛋白及p-ERK 蛋白 的相对含量。结果 酸剌激纽内细胞MUC5AC 转录及蛋白水平显著高于对照纽(p值均0.05) ，其 OGR1 及p-ERK 蛋白含量较 对照纽亦明显增加，酸刺激+转染OGRl siRNA 纽MUC5ACmRNA转录及蛋白水平显著低于酸剌激纽(p值均0.05) ，其 p-ERK 含量亦明显降低。而pH 7.4+0GRl siRNA 纽MUC5AC 蛋白含量及mRNA水平较pH7.4对照纽元明显差别，其p-ERK含量也变 化不大。酸剌激+PD98059 纽MUC5ACmRNA转录及蛋白水平显著低于酸刺激纽(p值均0.05) ，而 pH 7.4+PD98059 纽较对照 纽MUC5ACmRNA转录及蛋白水平无明显差异。结论 OGR1 可能通过激活ERK信号通路参与气道酸性微环境所致的人气 道黎膜上皮细胞MUC5AC表达。 关键词 和蛋白;酸性环境;卵巢癌G蛋白鹅联受体1 ;细胞外信号调节激酶 中图分类号 R310 .l7 文献标志码 A 文章编号 0258-4646(2014)02-0122-05 网络出版地址 !kcms/detaiI/21.1227.R.20 140123.1710.017.htm1 S阳dy of OGR1ÆRK Mediated M配hanismfor 由e Acid-induced Mucin 5AC Expression and 胁到cretion in Human Airway Epi由eIial Cells 1 1 2 ZHOU Wan , ZHOU Xiang-dong ,Juliy M. Perelman , Victor P. Kolosol (1. De阳阳lent of Respiratory Medicine ， ηle Se∞nd Affiliated H田pital of Chong伊Ig Medical University ,Chon例吨4αXHO， α由国; 2. Far Eastern Scien凶c Center of Physiology and Pathology of R四piration ， S证lerian Branch ,R国sian Academy of Medical Sciences ,Blagoveshchensk 675α泪， Russia) Abstract Objective To exp10re 由e related si伊且1 transduction mec