一步法和两步法毛细管等电聚焦测定蛋白质和多肽等电点的比较.pdfVIP

2013 年 6 月 Vol. 31 NO.6 ι 译 June 2013 Chinese Journal 01 Chromaωgraphy 537 - 542 定量蛋白质纽学专栏·研究论文 DOI , 10. 3724/SP. J . 1123.2013.03059 一步法和两步法毛细管等电聚焦测定蛋白质和多肤等电点的比较 高培峰1. 赵新颖1.2 ， 贺木易l ， 刘庆生3 ， 屈 锋I • ( 1.北京E望工大学生命学院.北京 1 00081; 2. 北京市理化分析测试中心，北京 l ∞089: 3. 中国农业科学院饲料研究所，北京 100081) 摘要:和l 刷一步法和附步法毛细管等电聚焦(clEF) 方法分离测定 u量 白质和多肤的等电点(pl) 。 讨论 f 附步法等 电聚焦过程所需的溶液组成、样品进样体积、聚焦电.II、聚焦时间和分离条件等因素对分离效果的影响。 并对一步 法和两步法进行了比较。 对细胞色素 C、血红蛋白、肌红蛋白、转铁蛋白和l 牛血清臼蛋白以及6 种多肤的分析结果 表明步法步骤简单，分离速度快.可测定单一组分的肘，也能快速分离混合蛋白 和多肤，但分离度较差，且不能 同时准确测定各组分的 pI: 两步法步骤复杂，分析时间较长，但能够同时分离并准确测定混合样品中各组分的 pI ， 所测的 pI 值与单一组分进行测定的结果基本一致。 两种方法可相互结合、互为补充，可广泛应用于两性生物微校 等电点的快速和准确测定。 关键词:毛细管等电聚焦; 一步法;两步法;蛋白质;多肤 中图分类号:0658 文献标i只码:A 文章编号:1000-87 日(2013 )06 -0537-06 Comparison of one-step and two-step methods for pI determination of proteins and polypeptides by capillary isoelectric focusing 1 1 2 1 J 1 GAO Peifeng , ZHAO Xinying . , HE Muyi , LIU Qingsheng , QU Feng • (J . School 01 LiJe Sciellce ， 如iJi叼 lnstitu. te 01 Technology , B均iing 100081 , Ch饥似 2. Beijin g Centeγ 01 Physical and Chemical Analysis , Beij切9 l00089 , China; 3. Feed Resear咄 I时litll1e. Chinese Acade 1n:lJ 01 Agγicultural Sciences , Beijing loo08l , Ch饥a) Abstract: One-step and two-step capillary isoelectric focusing ( cIEF ) methods were employed for the separation and pI