首次克隆了淡紫拟青霉几丁质酶基因 - yzxzcom.pptVIP

一、立项背景 项目共得到部委及省、院各级13个课题资助： 农业部行业专项 国家外专局项目 福建省发改委项目 福建省自然科学基金 福建省外专局项目 福建省农科院项目 三、主要创新点 三、主要创新点 2、优化了淡紫拟青霉的发酵条件 三、主要创新点 根据国内外文献检索，本项目研究在防治甘薯茎线虫、几丁质酶基因的克隆及表达、应用范围、活性多糖的结构分析、制剂工艺、农药登记等方面的研究，均未见同类报道。 在项目研究的基础上，共发表论文20篇，其中国家一级学报10篇，申请国家发明专利2项。 研制的淡紫拟青霉生物农药获得农药正式登记证2项，完成试验报告62篇，编写技术资料1本，培养博士2名、硕士4名。 项目获得以喻子牛教授为组长的专家组认可，专家组对项目在淡紫拟青霉菌株的总体研究、几丁质酶基因克隆、多糖结构分析以及成果的产业化与推广应用方面，给予了充分肯定，一致认为达到国际领先水平。 研制的淡紫拟青霉菌剂应用范围广，对多种作物线虫以及枯萎病等病害均有良好的防治效果，达到了很好的增产增收效果。 在我省的厦门、漳州、泉州、莆田等地的茄子、番茄、辣椒、烟草、甘薯等主栽作物上进行了大规模的推广应用，取得了很好的效果。 淡紫拟青霉菌剂对线虫病害的防效达到75-90%，平均每亩增产20-30%，6年4地的推广应用累计达到25万亩次，农民增收1.25亿元。 线虫生防菌淡紫拟青霉的研究与应用，扩大了淡紫拟青霉的应用范围，实现了综合防控，填补了国内外研究空白，实现农民增产增收，可望解决大量使用化学农药和化肥带来的残留问题。 以下是10位项目主要完成人员对本项目研究做出的贡献，包括项目的总体设计、实施、机理分析、产业化以及推广应用等。 * 我的汇报就到这里，谢谢各位专家！ 围绕着这个思路，我将从7个创新点入手介绍本项目的研究。创新点1，获得具有自主知识产权的高毒力淡紫拟青霉菌株。我们从被感染的线虫虫体以及线虫危害的植株病根、土壤上进行了广泛的分离筛选，获得一株对线虫具有高毒力的真菌，经形态学和分子生物鉴定为淡紫拟青霉，将其命名为NH-PL-2003，并进行了生物学特性研究。 创新点3，首次克隆了淡紫拟青霉几丁质酶基因。已有研究证明淡紫拟青霉分泌的几丁质酶对根结线虫的卵壳有消解作用，但该菌的几丁质酶基因及其同源性分析未见报道。我们采用同源基因策略方法，首次克隆了淡紫拟青霉的几丁质酶基因并获得其序列全长。通过Realtime PCR检测表明，当第3 天菌丝大量接触到卵，要穿入卵壳时，该基因大量表达，帮助消解卵壳的几丁质层。为研究淡紫拟青霉侵染根结线虫卵过程中的分子机制提供了重要的线索和依据。 创新点4，首次明确了淡紫拟青霉活性多糖的结构。通过柱层析分离获得淡紫拟青霉多糖，经单糖组成测定、红外光谱分析等方法，首次明确了多糖的化学结构为β-1,3-糖苷键连接的单糖组成单一的无分支葡聚糖，该研究属首次报道，发表研究论文2篇，其中在国家一级学报生物工程学报上发表论文1篇，对该方面的研究产生了深远的影响。 FAAS 线虫生防菌淡紫拟青霉的研究与应用 主要人员：刘 波、史 怀、唐建阳、黄素芳、李 芳、 肖荣凤、赵立平、朱育菁、林抗美、车建美、 苏明星、葛慈斌、刘 芸 主持单位：福建省农业科学院农业生物资源研究所 合作单位：福建凯立生物制品有限公司 汇报内容 一、立项背景 二、总体思路 三、主要创新点 四、主要技术参数和经济指标 五、国内外同类技术先进性对比 六、相关知识产权情况 七、成果应用和经济社会效益 八、推动行业科技进步和提高行业竞争力的作用和意义 九、项目完成人对项目的贡献 一、立项背景 1、植物寄生性线虫造成毁灭性的危害 普遍性：土传性病害，几乎所有作物都会受到线虫侵染 广泛性：世界各地都有发生 易传性：土壤、灌溉、流水、昆虫、移栽 隐蔽性：危害部位与表现症状部位不一致，难以发现 诱病性：使枯萎病等其他病原菌易于侵入植物，诱发多重病害 严重性：寄主作物长年减产甚至绝收，年经济损失大于1000亿美元 一、立项背景 2、线虫病害防治非常困难 农业防治：轮作、间作、抗性 化学防治：高毒、高量、高残 生物防治：细菌、真菌、天敌 适用品种少 环境污染，人畜中毒 不稳定性、不一致性 一、立项背景 3、线虫生防真菌-淡紫拟青霉 淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus）属半知菌纲、丝孢菌目、丝孢菌科、拟青霉属。 杀线功能 抗病功能 促长功能 增溶功能 寄生功能 产酶功能 4、项目立项资助 二、总体思路 前人研究 存在问题 研究创新 生物学 发酵培养 控害效能 田间应用 机理不够深入 活性成分不明 应用范围窄 国内无正式产品 机理研究少 应用范围窄 工艺水平低 国内无产品 自主产权菌株 几丁质酶基因