无毒型蛋白质快速染色试剂盒ProteinStainsL.PDFVIP

无毒型蛋白质快速染色试剂盒 Protein Stains L 品编号：C503011 包装规格：10 Assays 品简介 常用的考马斯亮蓝R-250灵敏度较低，需要的染色时间比较长，而普通的银染色灵敏度高，但是过程比较烦琐，染色效 果受水质和试剂纯度的影响比较大，染色液不容易保存。本试剂采用含有单一考马斯亮蓝G-250 的染色液，形成的胶体状染 色液不含有刺激性的甲醇和冰醋酸，安全无毒，该染色液只与蛋白结合，而与胶的结合程度低，不需要固定和脱色，只需要 简单的水洗步骤。产生的蛋白条带容易观察，具有背景极低、高灵敏度、实验方便快速等特点。在 规染色程序中，当条带 h 蛋白量大于200 ng时可以随时观察染色条带出现的情况，30 ng的蛋白条带在30 min染色和水洗后可见；而最低能够检测出 10ng左右的蛋白条带，则可以在一个小时左右完成，该染色液也可以使用微波炉进行15 min左右的快速染色，同时还适用于 c 印迹膜上蛋白条带的快速染色。该染色液可以用于SDS胶、非变性胶、NuPAGE胶、IEF胶或2D胶等，能够使用10次。 运输和保存条件 e t 将染色液在 温环境中运输和保存，保质期1 年。 o 试剂盒组成 i 组分 C503011 b 染色液 200 mL 操作步骤 n A常规的染色程序 o 1. 取出电泳后的聚丙烯酰胺凝胶，将胶放在合适大小的染色盘中，用20mL蒸馏水在摇床上清洗凝胶三次，每次5 min左右。 果使用的是非变性胶，只需要用蒸馏水冲洗凝胶一次5 分钟左右。 果使用的NuPAGE 胶，则需要用含50% 甲醇和 g 7%醋酸的固定液固定15 min，再用蒸馏水冲洗凝胶三次，每次5 分钟左右，以便去除固定液，同时染色液也可以方便 地渗入到胶中，增加染色的灵敏度。 n 2. 倒掉蒸馏水，加入20 mL染色液，置于摇床上，震荡染色1-2小时。 a 3. 倒掉染色液，用20 mL蒸馏水摇床上清洗凝胶两次，每次震荡清洗10 min左右，这时蛋白条带会更加清 ，可以看到5ng 左右的蛋白蓝色条带，再加入20 mL蒸馏水将凝胶保存。 s 增加水洗的时间和次数可以增加染色的灵敏度。 4. 拍照分析实验结果。 B微波炉法染色程序 以下程序对于1 mm厚的小胶在15 min 内可以得到很好的效果，尽管灵敏度稍微有点降低 （25ng左右），如果使用的胶较厚较 大，则需要增加使用的染色液和蒸馏水的量，同时相应增加微波炉上加热的时间。 1. 取出电泳后的聚丙烯酰胺凝胶，将胶放在合适大小的染色盘中，加入50 mL蒸馏水，在微波炉上加热45 sec，倒去蒸馏 水，再加入50 mL蒸馏水, 在微波炉上加热45sec，倒去蒸馏水，最后加入50 mL蒸馏水，在摇床上清洗凝胶5 min左右。 2. 倒去蒸馏水，加入20 mL染色液，在微波炉上加热24 sec左右或者直到染色液刚开始沸腾，再在摇床上震荡染色5min左 右。 需要随时观察微波炉加热的情况，以防止过度加热导致胶溶化和沸腾导致的染色液挥发。 3. 倒掉染色液，用20 mL蒸馏水摇床上清洗凝胶两次，每次震荡清洗5 min左右，这时蛋白条带会更加清 ，可以看到25 ng 左右的蛋