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重症肌无力中枢神经系统受损模型下肢体感诱发电位论文.doc
重症肌无力中枢神经系统受损模型下肢体感诱发电位论文
.freelyasthenia gravis;receptors,cholinergic;anti-bodies;evoked potentials,somatosensory
Abstract:AIM To explore if circulating acetylcholine recep-tor antibodies(AChRab)presented in myasthenia gravis(MG)sera can cause dysfunction of somatosensory transmis-sion in S of rats.METHODS Before and after applica-tion of somatosensory evoked potential(SEP)test,AChRab purified from MG sera .RESULTS Intracerebroventricular administration of MG patient AChRab,but not normal IgG resulted in losing of N20 al IgG,(23.1±0.7)ms vs(19.7±0.4)ms,P 0.01.Results also shoent and those treated al IgG ent vs normal IgG treatment,(19.7±0.6)ms vs(19.7±0.4)ms,P 0.05.CONCLUSION AChRab inject-ed into cerebroventricular system from MG sera may cause dysfunction of somatosensory transmission in rats and play a pathological role in the neuromuscular junction and S.
0 引言
重症肌无力(MG)是一种常见的自身免疫性疾病,乙酰胆碱受体抗体(AChRab)与神经肌接头(NMJ)处乙酰胆碱受体(AChR)结合,引起NMJ处乙酰胆碱(ACh)传递障碍是公认的致病机制[1] .然而近年来研究发现MG患者伴有多种中枢神经系统(S)损害的症状和神经电生理检查异常.Fotiou等[2] 发现MG患者视觉诱发电位P100 波幅降低且潜伏期明显延长;本实验室近年来利用脑干听觉诱发电位研究MG患者中枢神经系统功能,结果提示部分MG患者存在脑干功能异常[3] ,正中神经体感诱发电位N20 -P22 波幅降低和(或)潜伏期延长
[4] ;此外,Sa-phier等[5] 发现MG动物模型(EAMG)和尾壳核内注射MG患者血清的实验动物均有相似的异常脑电图表现;Lefvert等[6] 研究结果表明MG患者脑脊液中存在AChRab;Brenner等[7] 将从MG患者血清中提取的IgG注入大鼠侧脑室,结果发现不仅影响下丘脑―垂体―肾上腺轴的功能,而且出现MG模型样症状.上述研究提示S胆碱能系统功能障碍亦可能与MG模型样症状有关,但机制不明.作者为进一步探讨MG的S受损机制,从MG患者血清中分离出AChRab,然后再注入大鼠脑室系统,由此方法首先建立了MG中枢损害模型,用此模型研究MG患者AChRab引起S损害的机制,结果发现模型组与对照组比较,脑干听觉传递功能明显受损;用MG患者AChRab进行免疫组化染色发现AChRab可与中枢神经系统AChR免疫交叉结合[8] .本实验在利用该模型的基础上,观察大鼠侧脑室内注入AChRab前、后大鼠下肢坐骨神经体感诱发电位(SEP)的改变,以进一步寻求MG的S受损机制.
1 材料和方法
1.1 提取IgG 选择具有典型临床症状,抗胆碱酯酶药物试验阳性,血清AChRab滴度阳性,确诊为全身性MG的患者为研究对象.取患者血清10mL,用硫酸铵盐析法提取IgG,透析后分装冻存备用.另取健康人血清10mL,方法同上.
1.2 大鼠脑室内注射IgG 选择成年SD大鼠50只,雄性,体质量200~300g.随机分成对照组16只,实验组34只.戊巴比妥钠30mg kg-1 ,经腹腔麻醉,置于立体定向仪上,剪开头皮,暴露颅骨.选自Brega-ma点向后1.3mm,向左旁开1.3mm处为穿刺点,钻颅,然后自脑表面进针4.0mm,进入脑室,将提取的25μL IgG缓慢注入,隔日一次,共3次.对照组注射从正常人血清中提取的IgG,方法同上.
1.3 SEP测定 两组大鼠在脑室内注射IgG1g kg-1 ,腹腔麻醉,置于检查台上,剥离
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