雌、孕激素对ET1诱导的心肌细胞肥大反应的影响论文.docVIP

　　雌、孕激素对ET1诱导的心肌细胞肥大反应的影响论文 【摘要】 目的 观察不同浓度的17β雌二醇（E2）和孕酮（P）单独及联合运用对内皮素1 (ET1)诱导的心肌细胞肥大反应的影响。方法 以ET1刺激体外培养的新生大鼠心肌细胞，建立心肌肥大细胞模型，以心肌细胞［3H］亮氨酸（3Hleu）掺入作为心肌肥大反应的指标。结果 E2可明显抑制ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入的增加，而P对此无显著作用；E2/P联合运用时，P对E2降低ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的作用具有一定程度的抑制作用。结论 E2可抑制ET1诱导的心肌细胞肥大反应，E2/P联合使用时，P可一定程度的抑制E2对心肌的保护效应，应用时应以低浓度为宜。 【关键词】 17β雌二醇 孕酮 心肌细胞 肥大反应 【Abstract】 Objective To investigate the effects of 17βestradiol (E2) or progesterone(P) alone and bined E2/P treatment on cardiomyocyte hypertrophy induced by endothelin1（ET1）.Methods Myocardial cells from neonatal rats yocyte hypertrophy model yocyte hypertrophic response ent ent, P could e extent.Conclusion E2 can inhibit cardiomyocyte hypertrophy induced by ET1.EM培养基购自Gibco公司，HEPES购自生工生物工程（上海）有限公司，新生小牛血清为Hyclone产品，3Hleu为中国原子能科学研究所产品，其余均为国产分析纯。 1.3 主要实验仪器 Eppendorf高速离心机（centrifuge5417型，德国），78HEM培养液培养24 h，加或不加不同浓度（10-10～10-6mol/L）的E2、P预处理24 h，再加入10-8mol/L的ET1作用24 h后，每孔加入37 kBq/ml的3HLeu继续孵育16 h，移去培养液，用10％的三氯乙酸0.5 ml 4℃固定30 min，再用预冷的DHank’s液清洗两遍，最后用含1％SDS的0.2 mol/L的NaOH溶液0.5 ml裂解细胞，37℃孵育12 h后收集裂解液于含有8 ml闪烁液的测量杯中，摇匀放置在液体闪烁仪上测定放射性强度。 1.6 统计学处理 数据以均数±标准差（x ± s）表示，以t检验和单因素方差分析作统计学处理，P＜0.05为有统计学意义。 2 结果 2.1 ET1对心肌细胞形态的影响 用胰蛋白酶消化分离的新生SD大鼠心室肌细胞在培养72 h后，加入ET1（10-8mol/L），24 h后，心肌细胞呈现明显的肥大（图1）。 a.正常心肌细胞 b.肥大心肌细胞 图1 ET1诱导的肥大心肌细胞(×200) 2.2 E2预处理对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的影响 与对照组相比，10-8mol/L ET1可使心肌细胞3Hleu掺入增加（88.67±15.05）％（n＝6，P＜0.01）；该作用可被E2预处理24 h后明显抑制，10-10～10-6mol/L E2分别使ET1处理的心肌细胞3Hleu掺入下降，详见表1，其中以10-8mol/L E2作用最为明显；单独给予E2对心肌细胞3Hleu掺入没有显著影响（n＝6，P＞0.05）。表1 不同浓度E2对ET1诱导的心肌细胞3Hleu 注：与空白对照组比较*P＜0.01；与ET1组比较#P＜0.01 2.3 P预处理对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的影响 与对照组相比，10-8mol/L ET1可使心肌细胞的3Hleu掺入增加（94.48±27.18）％（n=6,P＜0.01）；10-10～10-6mol/L P预处理24 h对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入的增加无显著影响，详见表2。表2 不同浓度P对ET1诱导的心肌细胞3Hleu 掺入增加的影响 注：与空白对照组比较*P＜0.01 2.4 E2与P联合运用对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的影响 为了探讨E2/P联合应用对心肌肥大反应的影响，我们进一步以10-10、10-8、10-6mol/L的E2降低ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加作为对照，分别观察了10-10、10-8、10-6mol/L的E2与10-10、10-8、10-6mol/L的P联合运用时对心肌细胞