雷帕霉素联合卡托普利对大鼠同种异体血管病的作用论文.docVIP

　　雷帕霉素联合卡托普利对大鼠同种异体血管病的作用论文 .freelus or catopril and their bination on allograft angiopathy in rats. Methods The establishment of allograft model ly classified into four groups according to being given different medicine: the controlled group(A), catopriltreated group (B),.freelustreated group(C) and binationtreated group(D). At 0, 8 easured and the grafts al layers by light microscopy and the expression of TGFβ1, VCAM1, PA% and CD4+T cells count in the allograft by immunohistochemistry. Results There al thickness in both catopriltreated group and sirolimustreated group, especially in the bined treated group. The number of CD4+T cell infiltration in allograft of group B, group C and group D of group B and group D us on allograft angiopathy is significant and the effect ost obvious us; allograft angiopathy; rats 心脏移植后同种异体血管病(CAV)是影响心脏移植病人长期存活的一个主要原因。CAV病变呈现多样性,既有向心性纤维内膜增生的改变,也有类似于普通冠心病的偏心性粥样斑块形成1。笔者应用大鼠同种异体颈动脉移植模型,对雷帕霉素(RPM)和ACEI类药物卡托普利在移植物慢性血管病变中的作用进行研究,报道如下。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 动物 供体组：RPM 3 mg·kg-1·d-1;联合用药组:卡托普利(50 mg·kg-1·d-1)+RPM（1.5 mg·kg-1·d-1）。给药浓度根据实际体质量调整。 1.1.3 药品、试剂及器械 卡托普利(中美上海施贵宝制药有限公司,批号:0503061H);RPM(福建微生物研究所,批号:040301);一氧化氮试剂盒酶法(深圳晶美生物制品工程有限公司);TGFβ1试剂盒(美国Santa Cruz生物公司);PA、VCAM1试剂盒(美国NeoMarkers公司);鼠抗兔CD4试剂盒(英国Serotec公司);S105酶标仪,BX41双目显微镜,Imagepro Plus计算机显微摄像系统和JD801形态分析软件(美国捷达科技公司)。 1.2 方法 1.2.1 模型建立 供、受体以1％戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉。切除受体部分颈总动脉,将供体颈总动脉植入受体颈部, 110无损伤丝线间断内膜外翻缝合供、受体颈总动脉的两端(端端吻合),吻合时间＜20 min。移植后1周打开切口观察,动脉通畅为手术成功,血管栓塞为移植失败。 1.2.2 受鼠血清提取 分别于移植时和切取标本时抽取静脉血3 mL,离心吸取上层血清0.5 mL查NO的含量。 1.2.3 移植物切取和组织学研究 术后第8周切取移植动脉。切取的移植血管固定、包埋、切片,行苏木精染色。每个标本随机取5个不连续切面,计算机显微摄像系统将染色的病理图像输入计算机,JD801形态分析软件分析测量内膜厚度。 1.2.4 移植物CD4+T淋巴细胞浸润数计算 以细胞质染成棕黄色、黄色者为阳性细胞,在高倍镜下(×400)连续选取5个视野,网格目镜计数得出每个视野的阳性数,取平均值。 1.2.5 免疫组织化学染色法检测移植物转化生长因子β1（TGFβ1）、血管内皮细胞黏附因子1（VCAM1）的表达 光学显微镜观察阳性为细胞质中有棕色、黄色颗粒,测灰度值(JD801形态分析软件测得平均灰度,以灰度值大小与表达多少成反比)。核细胞增殖抗原（PA）阳性细胞的表达(阳性细胞核染色为棕褐、棕黄、浅黄色),随机计数500个细胞,以阳性细胞为分子计算PA表达指数并用百分比表示。 1.3 统计学处理 数据用x±s表示,应用SPSS 11.0统计软件进行方差分析及两两比较,