高效液相法测定平喘贴中苦杏仁苷的含量论文.docVIP

　　高效液相法测定平喘贴中苦杏仁苷的含量论文 【摘要】 目的 建立测定平喘贴中苦杏仁苷含量的方法。方法 采用高效液相色谱法，用Inertsil ODS-3 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，以甲醇-1‰磷酸(体积比21∶79)为流动相；流速为1.0 mL·min-1，检测波长为210 nm。结果 在0.12～1.2 μg范围内，峰面积与进样量的线性关系良好（r=0.9998），加样回收率为97.32％，RSD为1.07％。结论 该法简便、可靠、准确.freelination of amygdaloside in Pingchuan patch by HPLC CHEN Qiu-fang,LI Hua,ZHOU Yi-sheng (Guangdong College of Pharmacy，Guangzhou,Guangdong 510006，China； Institute for Drug Control in Huangshi, Huangshi,.freelethod for determination of amygdaloside in Pingchuan patch.Methods The sample n（4.6 mm×250 mm，5 μm）using methanol-1‰ phosphate solution （21∶79）as mobile phase. The floL·min-1 and the detection . Results The method exhibited good linearity from 0.12 to 1.2 μg (r=0.9998). The average recovery ethod is convenient,reliable and accurate for the quality control of the Pingchuan patch. Key ygdaloside；content determination 平喘贴是以麻黄、杏仁等中药制成的外用制剂，具有宣肺散寒平喘、清热化痰止咳之功效，用于治疗止咳平喘等症。苦杏仁苷是苦杏仁中的主要有效成分［1，2］。本文采用反相高效液相色谱法测定平喘贴中苦杏仁苷的含量，结果表明该法简便、准确、灵敏，可作为苦杏仁药材及其制剂的质量监控方法。 1 仪器与试药 Agilent-1100高效液相色谱仪，Vm×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇-1‰磷酸(体积比21∶79)，流速：1.0 mL·min-1，柱温：30 ℃，检测波长：210 nm。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取在105 ℃干燥至恒重的苦杏仁苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.12 mg的对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备 刮取贴膏1.0 g，精密称定，置烧瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，回流提取1 h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液2 mL，置中性氧化铝柱（100～200目，2 g，内径1 cm）上，用体积分数为50%的甲醇洗脱，收集洗脱液约9 mL，置10 mL容量瓶中，加磷酸1滴，用体积分数为50%的甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。 2.4 系统适应性试验 分别精密吸取对照品溶液6 μL，供试品溶液5 μL，注入液相色谱仪中测定。结果苦杏仁苷在20 min内出峰，而且与前后的峰均有较好的分离，理论板数在3 000以上。见图1。 按照本品制剂中的工艺制得除去苦杏仁的空白制剂，与供试品溶液色谱和苦杏仁对照品色谱比较，结果表明阴性样品无干扰。 1.苦杏仁苷 A.对照品 B.样品 C.空白阴性对照 图1 苦杏仁苷对照品（A）、供试品（B）和空白阴性对照（C）的色谱图（略） Fig.1 Chromatograms of amygdaloside (A)，sample (B)and negative control ygdaloside (C) 2.5 线性关系考察 分别精密吸取“2.2”项下制备的对照品溶液1，4，6，8，10 μL，进样测定，以峰面积（A）为纵坐标，对苦杏仁苷含量（m）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：A=1323.276 m-9.71，r=0.9998，结果表明苦杏仁苷在0.12～1.2 μg的范围内线性关系良好。 2.6 精密度试验 精密吸取“2.2”项下制备对照品溶液6 μL，进样测定5次，测定峰面积，结果RSD=0.71%（n=5），表明精密度较好。 2.7 稳定性试验 分别精密吸取同一份供试品溶液5 μL，于0、3、6、9、24 h进样，