普通免疫学-5-2013-抗体剖析.ppt

再应答特点 a，应答速度快 b，抗体主要为IgG，IgM很少，出现IgA和IgE c，Ab量大，具高亲和力 2、Td 和Ti 抗原的免疫应答 蛋白质抗原在T细胞缺乏时，不诱导Ab的产生 —— 胸腺依赖抗原（Thymus dependent antigen） Td 抗原激活B细胞，除需抗原第一信号外，还需Th细胞及其分泌的细胞因子作为第二信号 一些非蛋白抗原（多糖、脂类和核酸）不需Th细胞 ——非依赖性抗原（ Thymus independent antigen ） Ti 抗原诱导初次免疫应答，无记忆细胞产生、无重链转换和亲和力成熟的再次应答 3、Ig 类或同型转换（class or isotype switching） —— 保留相同的抗原特异性而转换产生不同类型的Ig Ag 刺激后，H 链发生类型转换 Honjo 和 Kataoka（1978）：类开关模式 类型转换原因：在V区 和C区之间出现DNA缺失，发生于其间的转换区（Swith region，S）序列附近 S区位于每个CH 基因的 5’ 端，且重复 重复序列：[(GAGCT)n(GGGGT)m]; 一般 n=2~5, 有时达17, m可达150 H链类型转换可能是对这些同源序列识别的结果 或 存在一种类转换识别蛋白，可识别不同S区，使之彼此结合而发生转换。 L V D J Sμ Cμ Cδ Sγ3 Cγ3 Sγ1 Cγ1 Sε Cε Sμ和Sγ1形成套环结构 Cμ Cγ3 Cδ Sε Cε 5’ 5’ 5’ 5’ 3’ 3’ 3’ 3’ IgG1 IgE Cγ1 Sμ Sγ1 L V D J L V D J L V D J Sμ Sγ1 Cγ1 Sμ Sγ1 Sε Cε Ig 类别转换 转换区 转换信号来自Th细胞合成的细胞介素 淋巴干细胞 前B细胞 幼B细胞 成熟B细胞 胞质内合成μ链 膜上表达IgM 浆细胞 B 细胞前体 （VDJ μ重排） 不依赖Ag 骨髓 外周 对抗原无应答 诱导耐受 对抗原应答 B 细胞成熟模式 L V D J μ1 μ2 μ3 μ4 S M1 M2 Cμ Poly（A） 信号位点1 Poly（A） 信号位点2 L V D J μ1 μ2 μ3 μ4 S M1 M2 L V D J μ1 μ2 μ3 μ4 S M1 M2 3’ 3’ 3’ AaAn 3’ 分泌型 5’ 5’ 5’ AaAn 3’ 膜结合型 5’ m RNA mRNA 前体 剪接、加尾 免疫球蛋白的表达 VH D J // // 300 13 4 CH Mouse antibody genes 免疫球蛋白基因的重排 V －variable segment J－jioning segment C－constant segment D－diversity segment 利根川进, 1987年，Nobel奖 纯化了抗体的mRNA，然后将其与DNA杂交并进行观察，这个实验可有效计算抗体的基因数目，结果表明远远少于抗体数目. Southern分子杂交技术尚未发明，因此DNA杂交实验是一件非常繁重的工作。首先需要用限制性内切酶对基因组DNA进行消化，然后利用大规模凝胶琼脂糖电泳进行分离，将包含特定条带的凝胶进行回收并在液相反应体系中进行DNA杂交。 由于切口平移（Nick-translation）和cDNA克隆技术均尚未发明，因此杂交探针使用的抗体轻链mRNA不得不首先从细胞中纯化，然后用放射性碘元素标计. 1976, 比较胚胎细胞(不产生抗体)和骨髓瘤细胞(产生抗体)中抗体轻链基因的分布情况时发现在胚胎期不同抗体基因的距离较远，而在骨髓瘤细胞中这些基因距离靠近，说明生殖细胞在发育成B淋巴细胞的过程中,抗体基因发生了重排现象. 利根川进抗体多样性遗传机理的阐明,预示着进入了分子免疫学时期,对免疫学的这项发现还改变了人们对