基因工程的基本工具和操作程序.ppt

高中生物复习课件 选修三 现代生物科技专题 异想天开 第一讲 基因工程的基本工具和操作程序 一、基因工程的诞生： 科技探索之路 二、DNA重组技术的基本工具 1、限制性核酸内切酶 限制酶的功能 思考 2、DNA连接酶 DNA的结构 3、基因进入受体细胞的载体 大肠杆菌质粒的特点： 载体应具备的条件： 基因工程的基本工具 三、基因工程的基本操作程序 1、目的基因的获取 从基因文库获取目的基因 基因文库的构建 利用PCR技术扩增目的基因 PCR（多聚酶链式反应）技术 PCR技术的过程 原核细胞基因的结构 真核细胞基因的结构 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 转化方法： 农杆菌转化法 基因枪法 导入动物细胞 导入微生物细胞 4、目的基因的检测和鉴定 原核细胞的基因结构及表达 请拿出你的课本（1--16页），双色笔和学案，还有你的 第一讲 基因工程的基本工具和操作程序 一、自主纠错、疯狂记忆（约3分钟） 对照参考答案纠正导学案的错误并理解记忆。 三、踊跃展示、高效点评、大胆质疑： 踊跃展示（5分钟）、高效点评（15分钟） 踊跃展示（5分钟）、高效点评（15分钟） 【课堂检测】参考答案 【合作探究】参考答案 学科班长总结点评： 祝同学们在卉原中学愉快地度过三年的高中生活，考入自己理想的大学！ ——基因工程的核心 （1）构建过程： （2）基因表达载体的组成： 插入基因 启动子 终止子 标记基因 复制原点 目的基因 启动子 终止子 复制原点 标记基因 常用的受体细胞： 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 （大肠杆菌、土壤农杆菌、枯草杆菌等） 将目的基因导入受体细胞的原理： 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 转化 ： 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 方法 将目的基因 导入植物细胞 将目的基因 导入动物细胞 将目的基因 导入微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——感受态细胞 思考： 为什么常选用微生物作为受体细胞？ 农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物。Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞的染色体上 花粉管通道法 空气加速管 微弹 材料 注入DNA 显微注射仪 将目的基因注射到动物细胞 Ca2+处理 易被吸收 感受态细胞 原核生物： 作为受体细胞。繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少。 质粒 不易被吸收 细胞类型 常用方法 受体细胞 转化过程 植物细胞 农杆菌转化法 体细胞 将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA 动物细胞 显微注射技术 受精卵 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵→受精卵→显微注射→早期胚胎培养→胚胎移植→发育成为具有新性状的动物 微生物细胞 Ca2+处理法 原核细胞 用Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 将目的基因导入受体的方法 * DNA 目的基因（DNA） 复制 RNA 转录 蛋白质 翻译 性状 ——检查是否成功 个体 水平 鉴定 检测染色体的DNA上是否插入了目的基因 个体水平鉴定 —— 性状鉴定分子水平检测 —— 分子杂交 检测目的基因是否转录出了mRNA 检测目的基因是否翻译出了蛋白质 分子杂交 DNA—DNA （探针） 抗虫、抗药、抗病等接种试验 分子杂交 DNA—RNA （探针） 分子杂交 抗原—抗体 DNA分子杂交示意图 采用一定的技术手段，将两种生物的DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。 P15思考与探究 与RNA聚合酶结合位点 基因1 基因2 基因间区 基因间区 基因间区 DNA 编码区 非编码区 非编码区 基因 mRNA 氨基酸序列 蛋白质 转录 翻译 全力投入会使你与众不同，你是最优秀的，你一定能做的更好！ 1、简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 2、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 3、简述基因工程原理及基本操作程序。 4、尝试设计某一转基因生物的研制过程。 【重点和难点】 1、三种基本工具及其作用。 2、基因工程载体需要具备的条件 。 3、基因工程基本操作程序的四个步骤。 4、从基因文库中获取目的基因，PCR技术。 【学习目标】 要求： 静心、动脑，深入思考。让自己知道哪些懂了，哪些还不懂，不懂的要用红笔画出来，以便讨论时重点突破。 温馨提示 疯狂记忆 1、基因工程的概念。 2、基因工程的基本工具。 3、基因操作的基本程序。 全力投入会使你与众不同,你是最优秀的。你一定