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DNA replication 线形复制子末端复制问题的解决: 5 5 3 3 将线形复制子转变为环状或多分子 T4 和l噬菌体 2. DNA 可能形成特殊的结构 末端形成发夹 3. 复制后末端会发生变化 真核生物的染色体DNA 末端相同单位的拷贝数变化 某些蛋白质可能会协助从线形末端的起始 腺病毒和噬菌体Φ29的DNA 脊髓灰质炎病毒RNA 端粒复制 关于端粒的两个问题： 1. 复制后产生粘性末端（sticky end）、染色体不稳定 2. 染色体末端DNA短缩 研究端粒的实验系统： 质粒 ? 酵母 线性质粒 - ARS + CEN + TEL（四膜虫） 端粒的结构与复制合成： Cn（A/T）m n?1，m=1-4 3’GGGGTT GGGG T T 5’TTGGGG TTGGGG TTGGGG TTGGGG 3’AACCCC 5’ 端粒复制 ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC AACCCCAAC 5’ 3’ 3’ 5’ dGTP ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTT ...AACCCCAACCCC AACCCCAAC 5’ 3’ 3’ 5’ dGTP ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC AACCCCAAC 5’ 3’ 3’ 5’ 3’ RNA template primase primase primase ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC CCCCAAC 5’ 3’ ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC CAACCCCAAC 5’ 3’ ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC CCAACCC CAACCCCAAC 5’ 3’ ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC AACCCCAACCC 5’ 3’ 末端型（strand displacement） 线性基因组，腺病毒 / ?29 （DNApol+55kD）Ser+dCTP，末端配对，不同步复制 * 关于DNA复制的基本问题： 1、双螺旋DNA复制的基本模型 2、参与DNA复制的蛋白质及其作用 3、不同生物中的DNA复制 DNA复制模型 半保留复制（semiconservative) 半不连续复制（semidiscontinuous） RNA引物 复制方向 双向复制 bidirectional （普遍） 单向复制 unidirectional 5’ 3’ 5’ 3’ Parental strands Semi-conservative Conservative Dispersive Daughter strands Meselson-Stahl 实验 14N-14N 14N-15N 15N-15N 15NH4Cl 14NH4Cl 20 min 40 min 半不连续复制 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 连续复制 不连续复制 冈崎片段（Okazaki fragment） 脉冲标记实验 [3H]dT DNA ligase 缺失实验 半不连续复制的证实 E.coli 1000-2000nt 真核生物 100-200nt DNA复制的方向与复制叉移动的方向 前导链（leading strand） 滞后链（lagging strand） RNA引物 ssDNA or dsDNA DNA 聚合酶 dNTP 所需其他酶 No DNA replication 发现 1. M13 DNA复制（E. coli extract） RN