基于酶鄄抗体共固定二氧化锆纳米信号探针的瘦肉精安培免疫传感器 .pdf

第4 1 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE )摇 研究报告 第6 期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2013 年6 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 828 ~834 DOI:10.3724/ SP.J.1096.2013.21169 基于酶鄄抗体共固定二氧化锆纳米信号探针的 瘦肉精安培免疫传感器研究 * 詹 盼摇 杜晓雯摇 干 宁摇 林赛钗摇 李天华摇 曹玉廷摇 桑卫国 (新型功能材料及其制备科学国家重点实验室基地,宁波大学材化学院,宁波315211) 摘摇 要摇 制备了基于酶鄄抗体共固定二氧化锆(ZrO )纳米探针进行信号放大的盐酸特伦克罗瘦肉精(CLB)检 2 测安培免疫传感器。 首先,利用ZrO 纳米粒子负载葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)和CLB抗体(Clen鄄 2 buterol antibody,anti鄄CLB),制得纳米探针(ZNPs/ GOD 鄄anti鄄CLB signal probe,简称ZNPG)。 同时将聚二烯丙 基二甲基氯化铵 [Poly (diallyldimethylammoniumchloride),PDDA]、氯化血红素(Hemin)和纳米金(AuNPs)层 层组装到多壁碳纳米管(MWCNTs)修饰的丝网印刷电极(SPCE)表面,制得SPCE 讦MWCNTs/ (PDDA/ Hemin/ AuNPs) 电流型传感器,可对H O 产生还原催化电流。 检测 CLB 时,将样品和ZNPG一起加入预先包埋好 n 2 2 CLB的96孔板底部。 样品CLB与板底CLB共同竞争结合孔溶液中的纳米探针ZNPG。 反应结束后加入葡萄 糖,板底ZNPG鄄CLB免疫复合物上的GOD催化葡萄糖氧化产生H O ,可通过传感器检测。 电流下降值(驻I)与 2 2 样品CLB成反比,可用于CLB的定量分析。 由于ZNPG上具有高的GOD酶标记密度,故可以显著放大检测信 号,提高检测灵敏度。 在最佳条件下(pH7.0,温育时间30 min,温育温度37 益),此传感器对 CLB 的检测范 围为0.003~100 滋g/ L,检测下限为1ng/ L,比酶联免疫分析法(ELISA)法灵敏度提高2个数量级,在猪饲料 样品中进行加标回收实验,平均回收率达93.6%,相对标准偏差(RSD)小于2.5%,精密度好。 同时该传感器 具有可重复使用、灵敏快速,适合于食物样品中痕量CLB现场检测。 关键词摇 竞争性酶联免疫分析;瘦肉精;酶鄄抗体共固定二氧化锆纳米探针;信号放大;安培免疫传感器 1摇 引摇 言 盐酸特伦克罗瘦肉精(Clenbuterol,CLB)是对人类健康危害最大的非法食品添加剂之一,可对人体 健康产生极大影响。 因CLB可以提高瘦肉率,一些不法商贩将其添加到动物饲料中,造成极其恶劣影 [1,2] 响。 许多食品检测机构已将瘦肉精列为常规检查之一 。 传统的CLB分析方法包括高效液相色谱 [3] [