水痘带状疱疹病毒疫苗株在Vero细胞中传代适应及ELISA检测血清IgG研究.pdfVIP

中文摘要 水痘是由水痘．带状疱疹病毒(Vaficella-Zoster 传染疾病。为了研制疫苗和有效诊断水痘，本文研究了vzV疫苗株在Vero细胞 中传代适应、制备VZV抗原工艺和ELISA方法。 将ⅥⅣ疫苗株在Wro细胞中连续传代培养，传至第9代时，CPE明显增多， PFU／ml，能在超低温条件下稳定保 病毒滴度从2～3 PFU／ml提高到--4．2 log log 存，表明毒株获得了适应性，可用于制备vzv抗原。培养条件试验表明，15L ELIsA) 收获病变细胞，经超声破碎、离心，制备了vzv全病毒ELISA(VAR 抗原。用TritonX．100裂解，通过Lentil 4B亲和层析纯化，制备 Lcetm_Sephrose 的稀释度达1：3000～1：4000。 研究了ⅥⅣVAR 根过氧化物酶作用底物为邻苯二胺，酶标抗体反应时间为120min。VerogpELISA 和VARELISA抗原加保护剂具有保存稳定性和可重复性。VerogpELISA检出 WHOⅥⅣ国际标准血清的抗体滴度较VARELISA提高了4倍，检出下限分别 筛查，获得了vzv阳性血清，测出的抗vzv IgG几何平均滴度优于人胚肺二 ELISA。 倍体2BS细胞制备的VAR VAR 量制备ⅥⅣ抗原。建立了Vero细胞制各的VZV IgG 方法的灵敏度、特异性和可重复性良好。因此，Vero细胞用于VzV诊断制品的 研究和生产是可行的，本研究为今后两种试剂盒的标准化和商品化奠定了基础。 关键词：水痘．带状疱疹病毒疫苗株：Vero细胞；传代与适应；亲和层析；ⅥⅣ 糖蛋白ELISA；vzv全病毒ELISA ABSTRACT Ⅷcella caused infectionof is a diseaseworldwide epidemic by Vailcella-Zoster and ofVzv virus(vzv)．Inthesis．adaptation present passages vaccinestrainsinVerocell andELISAwerestudied． cultures．antigenpreparation TheVZvwasinoeulatedand inVerocells．11le continuouslypassaged ofvinls cellswasobservedfromthe9th inthe adaptationtoVeto passageexpresscd ofvimsincreasedfrom2～3 more andthetiters cytopat