甲烷氧化混合菌的保藏方法研究.pdfVIP

微生物学通报 Jul. 20, 2014, 41(7): 1463−1469 Microbiology China © 2014 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130878 生物实验室 甲烷氧化混合菌的保藏方法研究 1 2 2 2* 江皓 缑仲轩 韩冰 邢新会 (1. () 102249) (2. 100084) 摘 要【目的】甲烷氧化混合菌是自然界中吸收甲烷的关键微生物，在甲烷氧化混合菌的研 究和应用中，首先要解决其长期稳定保藏的问题，保藏方法应能有效保持菌群结构和功能的完 整性、稳定性。【方法】以从煤矿土壤富集得到的两种结构稳定的甲烷氧化混合菌为实验体系， 研究对比了冷藏法、低温冷冻法、石蜡油冷冻法、甘油冷冻法4 种保藏方法，考察保藏前后混 合菌的生长状况、MMO 活性、菌群结构等。【结果】保藏6 个月后，除甘油冷冻法以外，经其 它3 种方法保藏的混合菌，都具有与保藏前相当的细胞密度、甲烷氧化能力、MMO 酶活以及 传代稳定性，且DGGE 图谱显示保藏前后的菌群结构变化不大。【结论】这3 种保藏方法都可 以有效的保持甲烷氧化混合菌功能和菌群结构的稳定性。 关键词甲烷氧化菌，混合菌，保藏方法，菌群结构与功能 Study on preservation methods of mixed methane-oxidizing bacteria JIANG Hao1 GOU Zhong-Xuan2 HAN Bing2 XING Xin-Hui2* (1. Institute of New Energy, China University of Petroleum, Beijing 102249, China) (2. Department of Chemical Engineering, Key Laboratory for Industrial Biocatalysis, Ministry of Education, Tsinghua University, Beijing 100084, China) Abstract: [Objective] Mixed methane-oxidizing bacteria are useful for reduction of methane emission. For research and application of mixed methane-oxidizing bacteria, their long-term stable preservation must be first solved. The preservation methods should be able to maintain the integrity and stability of the community structure and function. [Methods] Two kinds of stable mixed methane-oxidizing cultures en- riched from a coal mine soil were us