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亲和纯化 本章主要内容 一、亲和层析 (一)亲和层析的原理 (二)亲和层析的特点 (三)亲和层析的基本概念 (四)亲和层析的基本操作 (五)亲和层析的应用与实例 二、金属鳌合层析 三、亲和膜 亲和层析Affinity Chromatography 酶与辅酶或酶与底物（产物或竞争性抑制剂等） 抗原与抗体，凝集素与受体，维生素与结合蛋白， 凝集素与多糖（或糖蛋白、细胞表面受体） 核酸与互补链（或组蛋白、核酸多聚酶、结合蛋白） 细胞与细胞表面特异蛋白（或凝集素）等。 （一）亲和层析的原理 　 亲和层析法就是利用化学方法将可与待分离物 质可逆性特异结合的化合物（称配体或配基）连接 到某种固相载体上，并将载有配体的固相载体装柱， 当待提纯的生物大分子通过此层析柱时，此生物大 分子便与载体上的配体特异的结合而留在柱上，其 他物质则被冲洗出去。然后再用适当方法使这种生 物大分子从配体上分离并洗脱下来，从而达到分离 提纯的目的。 (一)亲和层析的原理 亲和的一对分子中的一方以共价 键形式与不溶性载体相连，作为固定相吸附剂 当含有混合组份的样品(流动相)通过此固定相时，只有和固定相分子有特异亲和力的物质，才能被固定相吸附结合，其它没有亲和力的无关组份就随流动相流出 然后改变流动组成份，将结合的亲和物洗脱下