《干细胞与组织工程》HSC.pptVIP

Hematopoietic Colonies 造血干细胞移植(HSC Transplantation,HSCT) 将富含造血干细胞血液输入经特殊处理的受体（患者），以期重新建立受损的造血系统和免疫系统或矫正异常造血的过程。 hematopoietic reconstitution immunological reconstitution HSCT的适应症 血液系统恶性肿瘤 造血衰竭性疾病：AA，MDS等 非血液系统恶性肿瘤 其他：放射病，遗传病，自身免疫性疾病, 基因治疗载体;AIDS?等 HSC移植分类 一、根据HSC来源分类 1 骨髓移植（BMT） 2 外周血造血干细胞移植（peripheral blood hematopoietic stem celltransplantation，PBHSCT） 3 脐带血造血干细胞移植（CBHCST） 4 CD34细胞移植（CD34 T） 二、根据供者分类 同基因(synogeneic) 2 异基因( allogeneic) 3 自体 （autologous） HSC移植分类 三、根据预处理的方法分类 1 清除骨髓性干细胞移植（MSCT） Myeloablative stem cell transplatation 2 非清除骨髓性干细胞移植（NSCT） Nonmyeloablative stem cell transplatation HSC移植分类 HSCT的基本过程 BMHSC ①组织配型： ABO血型；HLA ②术前准备：健康检查；遗传病、传染病筛查 ③自体输血准备：备用自体血600ml~800ml; 　　④麻醉：连续硬膜外麻 　　 ⑤采骨髓：髂前／后上棘、胸骨穿刺 ⑥保存液：肝素+RPMI1640/TC199 HSC采集 HSC采集 PBHSCT 1、HSC Mobilization： ① 正常成人PBSC占外周血液单个核细胞的1‰左右，经适当动员处理可提高至10‰ ; 　 　　②动员剂　　 HSC采集 肿瘤化疗药物：如环磷酰胺、马利兰、柔红霉素、阿糖胞苷等 造血细胞刺激因子：G-CSF、M-CSF、GM-CSF、IL-3、IL-6和SCF等 HSC Mobilization： ③动员方法：于PBSC单采前5d，皮下注射重组细胞集落刺激因子，如G-CSF2.5～5.0μg/（kg.d）；采集当天皮下注射较高剂量重组细胞集落刺激因子（如G- CSF5μg/kg），直至白细胞总数达20×109/L，血小 板达20×109/L后，静脉推注地塞米松10mg后1-2h 开始单采外周血造血干细胞．一般需单采5-7 　　　　　　次，每次均须计数单个核细胞总数，测定 　　　　　　　　　　CD34+细胞百分率 HSC采集 HSC Collection: 设备：CS-3000plus; MSC+血细胞分离机； 　　抗凝剂：枸橼酸／枸橼酸钠／葡萄糖（ACD） 　　采集量：MNC采集量约2×108/Kg体重， 　　　　　　MNC总数约1~2×1010, 　　　 血液总体积50~100ml HSC采集 血细胞分离 HSC保存与运输 非冷冻保存: 1、冷藏保存：肝素抗凝,加适量TC199培 养液,4℃保存, 尽早使用,最高期限7天; 超过3天效果较差。 2、培养保存：假如足够营养成分，33 ℃ ~37 ℃孵箱培养保存 HSC 成熟度高，生存期短； 原始程度越高，存活期越长。 冷冻保存 1、预处理： ①去脂肪：BMHSC静置或离心去脂肪； ②去红细胞：CS3000，Cobe离心分离； 　　　　　　　　羟已基淀粉沉淀RBC，洗涤； 淋巴细胞分离液离心分离； ③去T细胞：Mab处理，预防GVHD HSC保存与运输 冷冻保存: 加10%DMSO(防冻